一、實時熒光定量PCR系統簡介
實時熒光定量PCR系統主要用于運行實時熒光定量PCR實驗，通過熒光激發和采集的方式，對實驗過程進行實時監控，將實驗過程數據繪制成熒光曲線，實時呈現于儀器顯示界面，并對實驗數據進行擬合和分析，最后可生成PDF格式的實驗報告。
對取于其他動物體內的生物樣本（如血液，體液等）中包含的目標核酸，進行快速精準的定性和定量分析，同時也能夠對特殊樣本進行標準曲線，熔解曲線，基因分型等分析。
二、基本原理
實時熒光定量PCR儀器的原理：聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA擴增，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個溫度循環周期，使目的基因得以迅速擴增，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點，是基因擴增技術的一次重大革新。PCR技術可將極微量的目標DNA特異地擴增上百萬倍，從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。
實時熒光定量PCR技術是在常規PCR基礎上加入相應的熒光染料或熒光標記探針，在PCR反應過程中通過熒光信號變化，對整個PCR進程進行實時檢測，以熒光化學物質監測每次聚合酶鏈式反應（PCR）循環后產物總量的方法，通過內參或外參的方法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。
三、實時熒光定量PCR系統應用領域
◆食源性致病菌檢測
◆動植物源性檢測
◆植物科學與農業生物技術
◆基因突變及多態性
◆基礎科學研究
◆水體監測
◆病原核酸檢測
◆ 轉基因檢測
◆動物疫情監測
◆食品衛生檢疫
◆海關進出口檢疫
四、儀器基本結構
實時熒光定量PCR系統是實時檢測反應的儀器，主要由基因擴增熱循環系統、熒光實時檢測系統、微電路控制系統、計算機及應用軟件組成。其中兩個核心功能模塊：熱循環系統和熒光實時檢測系統。其中基因擴增熱循環系統工作原理與傳統基因擴增儀工作原理基本相同，采用半導體加熱制冷工作方式完成熱循環過程。熒光檢測系統主要有由熒光激發部件、光信號傳輸部件、熒光檢測部件、控制系統組成。
五、儀器特點
1、體積小，重量輕，方便攜帶，兼容0.2PCR單管、八聯管；
2、采用美國MARLOW定制型帕爾貼模塊高級別半導體芯片，新一代半導體升降溫技術，最快變溫速率可達每秒7度，使用壽命可達一百萬次循環；
3、采用采光檢測處理技術，自動調節熒光本底，提高熒光信號靈敏度和信噪比，獲得更佳結果；
4、13S四通道快速采光，熒光采集信號穩定，減少延時誤差；
5、采用免維護的長壽命LED光源，無需更換，獨立熒光通道，不同通道之間的串擾更小；
6、 恒流式控制電路，功率輸出平滑，延長 Peltier壽命，提高控溫精度；
7、具有過流、過溫、瞬時斷電數據自恢復等保護功能，儀器重啟后繼續運行未完成實驗，確保實驗安全運行；
8、強大的軟件分析功能，可以進行定量分析，熔解曲線分析，基因分型等，分析軟件升級，支持不同行業的軟件定制；
9、支持恒溫、熒光定量雙模式，適配市面上多數的恒溫PCR試劑盒和熒光定量PCR試劑盒；
10、自帶10寸彩色觸摸屏控制，也可以連接電腦控制。
六、儀器技術指標
“///” 符號表示國家標準目前沒有定義該項指標或者強制性要求。
指標名稱 | H160 | H320 | H480 | |
外觀 | ||||
外形尺寸 | 235mm*385mm*175mm（寬*深*高） | |||
重量 | 5.6kg | 5.7kg | 5.8Kg | |
電氣參數 | ~220V/50Hz，255W | |||
數據接口 | USB 2.0 *2（右側兩個） | |||
環境參數 | ||||
運行條件 | 溫度：10-30℃，濕度：20%~80% | |||
運輸及貯存條件 | 溫度：-20~55℃，濕度：20%~80% | |||
海拔高度 | <2500米 | |||
噪聲等級 | A計權，<60dB | |||
樣本參數 | ||||
樣本容量 | 16*0.2mL | 32*0.2mL | 48*0.2mL | |
試管類型 | 單管，八聯排試管 | |||
樣本容積 | 15-100uL | |||
溫度特性 | ||||
加熱/冷卻方式 | 半導體加熱/制冷 | |||
溫度范圍 | 4℃-99℃ | |||
最大升溫速率 | ≥5.5℃/s | |||
平均升溫速率 | ≥3.5℃/s | |||
最大降溫速率 | ≥4.5℃/s | |||
平均降溫速率 | ≥2.5℃/s | |||
控溫精度 | ≤±0.01℃ | |||
溫度準確度 | ≤±0.1℃ | |||
溫度均勻性 | ≤±0.3℃ | |||
光學特性 | ||||
熒光檢測通道數 | 4通道 | |||
發光器件 | 高亮度LED | |||
采光器件 | 高靈敏度，高信噪比光電二極管 | |||
適配探針或染料 | 第一通道：470/520 FAM,SYBR Green | |||
第二通道：530/570 HEX,JOE,VIC | ||||
第三通道：580/610 ROX,CY3.5,Texas-Red | ||||
第四通道：630/670 CY5 | ||||
檢測靈敏度 | 1個拷貝 | |||
線性檢測范圍 | 100~1010個拷貝 | |||
線性相關系數 | ≥0.999 | |||
通道交叉串擾 | 無串擾 | |||
檢測重復性 | ≤1.0% | |||
參考資料
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