基因組序列的迅速獲得推動了一門新興學科——功能基因組學的發(fā)展，這一學科重點關注基因功能的變化。擴增性片段長度多態(tài)性（Amplified restriction fragment length polymorphism，AFLP）分析以及反向遺傳學都是功能基因組學的重要組成部分。

傳統(tǒng)的反向遺傳學，例如用轉座子（transposon）敲除特定基因，雖然可以準確測定表型，但需要進行耗時的轉基因或復雜的組織培養(yǎng)。而且由于這種基因敲除的方法將整個基因敲除，無法觀察到活性基因功能部分缺失的結果。

為克服此基因敲除方法的局限性，進一步獲得關于活性基因突變的信息，F(xiàn)red Hutchinson癌癥研究中心的研究者們發(fā)明了一種定向誘導基因組局部突變（TILLING： Targeting Induced Local Lesions In Genomes）技術。該方法具有簡單的特點，它利用化學突變方法來獲得所有基因的傳統(tǒng)的點突變等位基因系列。對那些表型分析時會牽涉到亞致死等位基因的重要基因，TILLING的方法具有其*的優(yōu)勢。隨著TILLING方法有效應用到越來越多的生物種類，如果蠅，擬南芥，斑馬魚，玉米等，它在遺傳學研究方面的重要價值也越發(fā)體現(xiàn)出來。

但由于點突變一般很難被檢測出來，一直是TILLING技術應用上的一個障礙。要得到好的結果，要求檢測儀器不僅靈敏度高，還能夠識別假陽性位點。我們在這兒給大家引薦一種更簡便，靈敏，準確的高通量TILLING分析技術：雙色紅外熒光檢測技術。

雙色紅外熒光檢測技術是美國LI-COR公司的技術。LI-COR長期致力于此項技術在生物學研究中的應用，他們開發(fā)的Odyssey雙色熒光掃描系統(tǒng)及DNA遺傳分析系統(tǒng)都取得了很大成功。由于雜質、干擾分子在紅外區(qū)幾乎不發(fā)光，用紅外熒光進行檢測的背景非常低，靈敏度很高，可檢測到低達1moles的熒光分子。加上雙通道檢測（680nm激發(fā)，710nm檢測；780nm激發(fā)，820nm檢測），兩個通道檢測波長相距110nm，相對于通常的可見熒光四色檢測來說，幾乎沒有光譜重疊的干擾（見下圖），保證了TILLING分析中每一個突變堿基的準確識別及整個檢測的靈敏度。