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啟動子克隆方法研究進展2017/8/14

隨著基因工程的發展，常常需要構建一種能高水平表達異源蛋白質的表達載體。啟動子對外源基因的表達水平影響很大，是基因工程表達載體的重要元件。因此研究啟動子的克隆方法，對研究基因表達調控和構建表達載體至關重...

PCR反應的五要素2017/8/7

1、引物引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大...

免疫PCR [Immuno PCR, Im2017/8/2

一、定義；免疫PCR是利用抗原抗體反應的特異性和pcr擴增反應的*靈敏性而建立的一種微量抗原檢測技術。用抗體檢測抗原是免疫學的zui基本方法，用酶或同位素標記抗體可使檢測的敏感性提高，常用的定量檢測方...

RNA質量的經驗談！2017/7/18

1）檢測RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分別代表了核酸、背景（溶液渾濁度）、鹽濃度和蛋白等有機物的值。一般的，我們只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82....

基因克隆：感受態細胞制作2017/7/10

方法一A液：1M，MnCl2：B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用無菌水配，配后不需滅菌；C液稱取CaCl20.10g，KCl1.18g，全部轉入細口試劑瓶，然后加入46ml三蒸水，輕輕振...

推薦：RNA的制備2017/7/4

一、mRNA的分離與rRNA和tRNA不同的是，哺乳動物細胞的絕大部分mRNA在其3’端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纖維素親和層析法從大量的細胞RNA中分離mRNA。在構建c...

用RNAi技術研究基因功能2017/6/29

February6,2004—AmethodfordeterminingthefunctionoflargenumbersofgenesisbeingdevelopedａndpilotedbyHowa...

RNAi的應用2017/6/26

1.研究基因功能的新工具已有研究表明RNAi能夠在哺乳動物中滅活或降低特異性基因的表達，制作多種表型，而且抑制基因表達的時間可以隨意控制在發育的任何階段，產生類似基因敲除的效應。線蟲和果蠅的全部基因組...

RNAi技術的研究進展與發展前景2017/6/22

(RNAinterference，RNAi)是1998年由Fire等在線蟲中發現的一種轉錄后的基因沉默(Posttranscriptionalgenesilencing，PTGS)機制。雙鏈RNA(d...

士鋒EST技術介紹2017/6/15

摘要：隨著人類基因組計劃的順利進行，EST技術被廣泛應用于基因識別、繪制基因表達圖譜、尋找新基因等研究領域。利用人類基因組研究不斷產生的數據，從ESTs即cDNA的部分序列入手，通過同源篩選，獲得基因...

士鋒PCR技術（五）：常見問題分析與對策2017/6/12

PCR產物的電泳檢測時間一般為48h以內，有些于當日電泳檢測，大于48h后帶型不規則甚致消失。假陰性，不出現擴增條帶pcr反應的關鍵環節有①模板核酸的制備，②引物的質量與特異性，③酶的質量及，④PCR...

RNAi在動物實驗中表現良好2017/6/2

研究人員利用包裝入病毒載體中的小分子RNA對有遺傳疾病的小鼠進行治療。這一成果提高了RNA干擾技術能夠運用在人類臨床試驗上的可能性。亨丁頓舞蹈癥（Huntington’sdisease）和脊髓性小腦萎...

PCR技術*講座2017/5/31

聚合酶鏈反應(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要...

煙酰胺乙酰膽堿受體在凋亡中的作用通路圖2017/5/24

煙酰胺乙酰膽堿受體在凋亡中的作用Nicotinicacetylcholinereceptorsareessentialforneuromuscularsignalingａndarealsoexpres...

Fas/Fas L信號通路圖2017/5/22

fas/FasL信號通路zui早被證明在細胞凋亡中起著重要的作用。Fas是一種跨膜蛋白，屬于腫瘤壞死因子受體超家族成員，它與FasL結合可以啟動凋亡信號的轉導引起細胞凋亡。它的活化包括一系列步驟：首先...