當前位置：上海士鋒生物科技有限公司>>公司動態>>轉化子DNA的快速鑒定
實驗目的
1、選擇性培養基上的轉化子為材料檢測重組質粒dna分子的大小，選出合理的重組的轉化體菌株。
2、掌握快速細胞破碎法，測定大小不等的質粒DNA。
實驗原理
利用Cracking gel緩沖液，采用快速細胞破碎法直接從菌體中提取DNA
實驗操作
（一）制備0.8%瓊脂糖凝膠(30 ml)
（二）取eppendorf管，每管加30μl Cracking gel緩沖液
（三）每扁頭牙簽，將菌落刮到Eppendorf管中
（四）在37℃水浴中保溫15分鐘
（五）取出各管，40℃，12,000 rpm/min，離心15分鐘
（六）立即吸出各管上清液15μl，進行點樣電泳
（七）當溴酚蘭遷移到凝膠板的2/3處時，停止電泳。
（八）將電泳凝膠染色30分鐘
觀察質粒的遷移距離，并拍照供進一步分析。
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