1998年，Andrew Fire和Craig Mello提出了一項新技術：通過dsRNA誘導特異基因的沉默，即所謂RNAi。2000年，Amy Pasquinelli等將lin-4和let-7作小時序RNAs(stRNAs，mall temporal RNAs)。

RNA干涉(RNAi)在實驗室中是一種強大的實驗工具，利用具有同源性的雙鏈RNA(dsRNA)誘導序列特異的目標基因的沉寂，迅速阻斷基因活性。sirna在RNA沉寂通道中起中心作用，是對特定信使RNA(mRNA)進行降解的指導要素。siRNA是RNAi途徑中的中間產(chǎn)物，是RNAi發(fā)揮效應所必需的因子。SiRNA的形成主要由Dicer和Rde-1調(diào)控完成。

由于RNA 病毒入侵、轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)錄、基因組中反向重復序列轉(zhuǎn)錄等原因,細胞中出現(xiàn)了dsRNA，Rde-1(RNAi缺陷基因-1)編碼的蛋白質(zhì)識別外源dsRNA，當dsRNA達到一定量的時候，Rde-1引導dsRNA與Rde-1編碼的Dicer(Dicer是一種RNaseIII 活性核酸內(nèi)切酶，具有四個結(jié)構域：Argonaute家族的PAZ結(jié)構域，III型rna酶活性區(qū)域，dsRNA結(jié)合區(qū)域以及DEAH/DEXHRNA解旋酶活性區(qū))結(jié)合，形成酶-dsRNA復合體。在Dicer酶的作用下，細胞中的單鏈靶mRNA(與dsRNA具有同源序列)與dsRNA的正義鏈互換，原來dsRNA中的正義鏈被mRNA代替而從酶-dsRNA復合物中釋放出來，然后，在ATP的參與下，細胞中存在的一種RNA誘導的沉默復合體RNA-induced silencing complex (RISC，由核酸內(nèi)切酶、核酸外切酶、解旋酶等構成，作用是對靶mRNA進行識別和切割)利用結(jié)合在其上的核酸內(nèi)切酶的活性來切割dsRNA上處于原來正義鏈位置的靶mRNA分子中與dsRNA反義鏈互補的區(qū)域，形成21-23nt的dsRNA小片段，這些小片段即為siRNA。

RNAi干涉的關鍵步驟是組裝RISC和合成介導特異性反應的siRNA蛋白。SiRNA并入RISC中，然后與靶標基因編碼區(qū)或UTR區(qū)*配對，降解靶標基因，因此說siRNA只降解與其序列互補配對的mRNA。其調(diào)控的機制是通過互補配對而沉默相應靶位基因的表達，所以是一種典型的負調(diào)控機制。siRNA識別靶序列是有高度特異性的，因為降解首先在相對于siRNA來說的中央位置發(fā)生，所以這些中央的堿基位點就顯得極為重要，一旦發(fā)生錯配就會嚴重抑制RNAi的效應，相對而言，3′末端的核苷酸序列并不要求與靶mRNA*匹配。

micrornA(miRNA,微RNA)即為長度為22nt左右的5′端帶磷酸基團、3′端帶羥基的非蛋白編碼的調(diào)控小RNA家族。miRNA廣泛存在于真核生物中，不具有開放閱讀框架，不編碼蛋白質(zhì)，一般長20-24nt，miRNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是發(fā)夾狀結(jié)構，在RNaseⅢ酶切后以雙鏈形式存在，zui后釋放互補鏈，miRNA成熟。成熟的miRNA 5′端的磷酸基團和3′端羥基則是它與相同長度的功能RNA降解片段的區(qū)分標志。

miRNA的又一特點——基因表達時序性。MiRNA表達的時序性和組織特異性提示人們miRNA的分布可能決定組織和細胞的功能特異性，也可能參與了復雜的基因調(diào)控，對組織的發(fā)育起重要作用。miRNA可能的形成及作用機制為：先由長的內(nèi)源性轉(zhuǎn)錄本(pri-miRNA)生成70nt左右的miRNA前體(pre-miRNA)，然后在Dicer酶的作用下使其加工成為一個不穩(wěn)定的dsRNA分子，接著迅速被降解剪切為22nt左右的單鏈RNA(這種單鏈RNA及以后的miRNA只是Dicer作用下pre-miRNA被剪切的一個臂，可能是3′端的一個臂，也可能是5′端的一個臂，不同RNA可能是同一pre-miRNA的不同臂)，之后被PPD(PAZ&Piwi domain)蛋白家族識別，形成RNA-蛋白質(zhì)復合體即miRNA核蛋白體(miRNP),進而形成成熟的miRNA。miRNA識別并與靶標基因3′UTR區(qū)部分配對，從而抑制靶標基因的翻譯。

miRNA基因是一類高度保守的基因家族，按其作用模式不同可分為三種：*種以線蟲lin-4為代表，作用時與靶標基因不*互補結(jié)合，進而阻遏翻譯而不影響mRNA的穩(wěn)定性，這種miRNA是目前發(fā)現(xiàn)zui多的種類。第二種以擬南芥miR-171為代表，作用時與靶標基因*互補結(jié)合，作用方式和功能與siRNA非常類似，zui后切割靶mRNA,這說明某些miRNA和siRNA一樣參與了機體內(nèi)一些特異性mRNA的剪切過程。第三種以let-7為代表，它具有以上兩種作用模式。

miRNA對生長發(fā)育進行更為重要的調(diào)控作用。同時，科學家們也發(fā)現(xiàn)人類基因組中大約有255個編碼miRNA基因，約占人類基因數(shù)的1%，但尚不清楚其功能。zui近科學家發(fā)現(xiàn)小RNA 與‘epigenetic’現(xiàn)象有。所謂epigenetic 是指并不涉及遺傳序列的特征性的遺傳改變。有人已試圖將小RNA 用于抗病毒治療之用,認為它們有可能抑制HIV21 和灰質(zhì)類病毒丙型肝炎病毒的轉(zhuǎn)錄,以及也可能用于腫瘤的治療。

miRNA與siRNA之間有許多相同之處：1.二者的長度都約在22nt左右。2.二者都依賴Dicer酶的加工，是Dicer的產(chǎn)物，所以具有Dicer產(chǎn)物的特點。3.二者生成都需要Argonaute家族蛋白存在。4.二者都是RISC組分，所以其功能界限變得不清晰，如二者在介導沉默機制上有重疊。5.miRNA和siRNA合成都是由雙鏈的RNA或RNA前體形成的。

miRNA與siRNA的不同點：1.根本區(qū)別是miRNA是內(nèi)源的，是生物體的固有因素;而siRNA是人工體外合成的，通過轉(zhuǎn)染進入人體內(nèi)，是RNA干涉的中間產(chǎn)物。2.結(jié)構上，miRNA是單鏈RNA，而siRNA是雙鏈RNA。3.Dicer酶對二者的加工過程不同，miRNA是不對稱加工，miRNA僅是剪切pre-miRNA的一個側(cè)臂，其他部分降解;而siRNA對稱地來源于雙鏈RNA的前體的兩側(cè)臂。4.在作用位置上，miRNA主要作用于靶標基因3′-UTR區(qū)，而siRNA可作用于mRNA的任何部位。

5.在作用方式上，miRNA可抑制靶標基因的翻譯，也可以導致靶標基因降解，即在轉(zhuǎn)錄水平后和翻譯水平起作用，而siRNA只能導致靶標基因的降解，即為轉(zhuǎn)錄水平后調(diào)控。6.miRNA主要在發(fā)育過程中起作用，調(diào)節(jié)內(nèi)源基因表達，而siRNA不參與生物生長，是RNAi的產(chǎn)物，原始作用是抑制轉(zhuǎn)座子活性和病毒感染。