TB1 Chemically Competent Cell 產品說明書

產品規格

TB1：                             10×100μl

pUC19（control vector）：10pg/μl           10μl

保存條件：-80℃

基因型

 F^– ara Δ(lac-proAB) rpsL (Str^r)[φ80 dlacΔ(lacZ)M15] thi hsdR

產品說明

TB1感受態細胞來源于JM 83，是JM 83 hsdR型，缺少 BL21 (DE3)菌株的 T7 RNA polymerase，適合NEB公司的pMAL 系列質粒原核蛋白表達(The pMAL  vectors use the E. coli RNA polymerase)，經pUC19質粒檢測轉化效率高達10⁸cfu/μg。

操作方法

1. 取100μl冰上融化的TB1感受態細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

3. 向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

注意事項

1. 感受態細胞好在冰上融化。

2. 混入質粒時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。