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中文名：Hoechst33258染色液(1mg/ml)

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：1ml

分類：細(xì)胞染色

保存：—20℃,避光,12個(gè)月

用途：細(xì)胞凋亡檢測(cè)，普通細(xì)胞核染色，常規(guī)的DNA染色。

說(shuō)明：Hoechst33258染色中l(wèi)eagene公司推薦采用該試劑；Hoechst33258是一種熒光染料，可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低；染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)，可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

Hoechst33258染色液(1mg/ml)

Hoechst33258染色液(1mg/ml)操作步驟：

1、固定的組織細(xì)胞染色

a.對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑；隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst33258染色；如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst33258染色。

b.對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258工作液，覆蓋住樣品即可；對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積的工作液，混勻；室溫放置3-5分鐘。

c.吸除Hoechst33258染色液，用TBST，PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。

d直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察；細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

2、活細(xì)胞染色

a.根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求，用無(wú)菌去離子水稀釋到自己所需濃度，即為Hoechst33258染色工作液；細(xì)胞核染色時(shí)，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml。

b.取96，24，6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài)；按96孔板加入100μl，24孔板加入500μl，6孔板加入1ml的比例，加入適當(dāng)?shù)腍oechst33258染色液，染液必須充分覆蓋細(xì)胞。

c.在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)。

d,輕輕吸除Hoechst33258染色液。

e.用無(wú)菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次。

f.進(jìn)行熒光檢測(cè)。

Hoechst33258染色液(1mg/ml)注意事項(xiàng)：

1、Leagene Hoechst33258染色液(1mg/ml)應(yīng)稀釋至合適的濃度后使用。

2、熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光衰減封片劑；建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)，活細(xì)胞或組織染色后應(yīng)立即觀察。

3、避免反復(fù)凍融，否則容易失效。

4、Hoechst33258對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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標(biāo)簽：Hoechst33258染色液(1mg/ml)