DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B是將二乙胺基乙基鍵合在快流速瓊脂糖凝膠上形成的一種弱陰離子交換介質(zhì)，DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用說(shuō)明書(shū)由上海遠(yuǎn)慕生物提供，本司現(xiàn)貨供應(yīng)ELISA試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品，動(dòng)物血清，抗體，培養(yǎng)基，溶液，緩沖液，染色液，生化試劑，化學(xué)試劑，實(shí)驗(yàn)耗材，細(xì)胞株，更多系列請(qǐng)！

DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B參數(shù)說(shuō)明

中文名：DEAE-瓊脂糖凝膠CL-6B

英文名：DEAE Sepharose CL-6B

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：100ml、500ml

粒徑： 45-165μm

配基基團(tuán)：carboxymethyl(羧甲基)

總離子交換量：0.09-0.13mmol/g凝膠

工作PH值：6-10

操作溫度：4-40℃

性狀(以下信息僅供參考)：含20%乙醇，底部為乳白色膠體。

保存：2～8℃

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)適用于各種帶陽(yáng)性電荷生物大分子的濃縮純化等。

DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B

DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B適用范圍

本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機(jī)械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點(diǎn)，非特異性吸附低，回收率高，適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)，適用于在pH工作范圍內(nèi)可形成負(fù)離子的生物大分子的分離純化，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用方法

1、裝柱：

a、讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。

b、根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液(按凝膠：緩沖液=3：1的比例)配成勻漿。

c、將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜)，務(wù)必使底端無(wú)氣泡。

d、用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開(kāi)柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

e、打開(kāi)蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò)，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

2、平衡：

讓平衡緩沖液以一定流速流過(guò)柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡液是低濃度的緩沖溶液，如Tris 、PBS等。

3、上樣：

a、樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。

b、一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。

c、介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度小，介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附較牢。用DEAE介質(zhì)時(shí)，推薦的pH值是大于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn)1個(gè)單位。

4、洗脫：

DEAE介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進(jìn)行洗脫，常用增大鹽濃度的辦法洗脫。

5、再生

一般用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗或減小pH洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用；若有失活蛋白質(zhì)或脂類(lèi)物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗(CIP)除去。

6、在位清洗

a、對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M Nacl去除。

b、對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類(lèi)，可用1M NaOH 去除。

c、對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類(lèi)等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡；清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。

7、注意：

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入；在使用過(guò)程中，不能使用強(qiáng)酸，如使用酸洗，應(yīng)使用濃度低于0.1 M的冰醋酸。

8、去熱源：

用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下方法步驟去除：

a、2倍柱體積的70%乙醇；

b、2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5；

c、1倍柱體積4M尿素；

d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl；

e、以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。

9、消毒

用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

10、滅菌

置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下30分鐘。

DEAE-瓊脂糖凝膠 CL-6B注意事項(xiàng)

1、產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20%乙醇)，通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過(guò)的柱子貯存在4℃(20%乙醇)。

2、本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸;避免在pH值<4時(shí)長(zhǎng)時(shí)間暴露(一周，20℃)。

3、保質(zhì)期：5年。

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