上海遠(yuǎn)幕生物現(xiàn)貨供應(yīng)藍(lán)色-瓊脂糖凝膠 CL-6B，藍(lán)色-瓊脂糖凝膠 6FF ，紅色-瓊脂糖凝膠 6FF，肝素-瓊脂糖凝膠 6FF，肝素-瓊脂糖凝膠 H.P.，谷胱甘肽-瓊脂糖凝膠 4B不同型號(hào)的瓊脂糖凝膠，詳細(xì)講述藍(lán)色-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用說明等咨訊，了解更多瓊脂糖凝膠產(chǎn)品請(qǐng)!

藍(lán)色-瓊脂糖凝膠 CL-6B參數(shù)說明

中文名：藍(lán)色-瓊脂糖凝膠 CL-6B

英文名： Blue Sepharose CL-6B

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：25ml、100ml

工作PH值：3-12

操作溫度：4-40℃

結(jié)構(gòu)成分：6%交聯(lián)瓊脂糖

保存條件：4℃

性狀：白色微球，凝膠狀，保存在20%酒精溶液中

應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測(cè)定等

藍(lán)色-瓊脂糖凝膠 CL-6B使用說明

藍(lán)色-瓊脂糖凝膠 CL-6B操作步驟

1、裝柱：

a、讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。

b、根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液(按凝膠：緩沖液=3：1的比例)配成勻漿。

c、將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜)，務(wù)必使底端無氣泡。

d、用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

e、打開蠕動(dòng)泵，讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

2、平衡：

讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡液是低濃度的緩沖溶液，如Tris 、PBS等。

3、上樣：

a、樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。

b、一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。

c、介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度小，介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附較牢。用DEAE介質(zhì)時(shí)，推薦的pH值是大于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn)1個(gè)單位。

4、洗脫：

DEAE介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進(jìn)行洗脫，常用增大鹽濃度的辦法洗脫。

5、再生:

一般用高鹽濃度的緩沖液(含1~2mol/L NaCl)洗或減小pH洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用;若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉，可用在位清洗(CIP)除去。

6、在位清洗:

a、對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M Nacl去除。

b、對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用1M NaOH 去除。

c、對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡;清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。

7、注意：

在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入;在使用過程中，不能使用強(qiáng)酸，如使用酸洗，應(yīng)使用濃度低于0.1 M的冰醋酸。

8、去熱源：

用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下方法步驟去除：

a、2倍柱體積的70%乙醇;

b、2倍柱體積50mM Tris-HCl pH7.5;

c、1倍柱體積4M尿素;

d、3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl;

e、以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

9、消毒:

用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

10、滅菌:

置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下30分鐘。

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