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Triton-NH4OH細胞裂解液使用說明書

【信息說明】

產品名稱：Triton-NH4OH細胞裂解液

規格：100ml/500ml

供應商：遠慕生化試劑廠家

分類：細胞組分分離

儲存條件：4℃,12個月

用途：裂解緩沖液

主要成分：無菌溶液。主要由0.5% Triton X-100、20mM NH4OH、PBS組成。

【使用方法】

A、組織細胞樣本的常規操作

1、制備細胞懸液: 新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當方法制備成細胞懸液，離心棄上清。

2、裂解：加入3～5倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、離心： 4℃，離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機，本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2和步驟3各一次。

5、洗滌：根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，離心2～3min，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

6、如有必要，重復上述步驟5一次，共洗滌1～2次。

7、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀，進行計數、培養等后續實驗。

B、血液樣本的常規操作

1、取新鮮抗凝血，離心5min，棄上清。

2、 裂解：加入6～10倍細胞沉淀體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂解。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作。

3、離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清。如無低溫離心機，本步驟亦可在室溫下操作。

4、如果發現紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2和步驟3一次。

5、洗滌: 根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，輕柔混勻重懸沉淀。4℃，離心2～3min，棄上清，該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

6、根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀，進行計數、培養等后續實驗。

注意： 對于微量或少量的血液樣本，可以不用第1步操作，可直接加入10倍血液體積的Triton-NH4OH Lysis Buffer進行第2步操作，并在4℃或室溫裂解4～15min。

【簡介說明】

在生物科研領域，經常需要去除紅細胞，去除紅細胞的方法有多種，如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Leagene Triton-NH4OH細胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)經過優化配方，在裂解無核紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(Lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。

本裂解液經過濾除菌，經過Triton-NH4OH Lysis Buffer處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續的細胞培養、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規的分析和檢測。

【自備材料】

1、胰蛋白酶

2、離心機

3、PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液

4、胎牛血清

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標簽：     Triton-NH4OH細胞裂解液