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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

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改良番紅O-固綠軟骨染色液染色原理

時(shí)間:2018/6/11閱讀:1674
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  改良番紅O-固綠軟骨染色液的相關(guān)咨訊由上海遠(yuǎn)慕生物提供詳細(xì)講述,本司的染色液包含:甘油-孔雀綠染色液,彈力纖維染色液(改良Gomori醛品紅法),甘油-亞甲藍(lán)染色液,更多染色液產(chǎn)品請(qǐng)訂購(gòu)!

 

  【信息說(shuō)明

  產(chǎn)品名稱:改良番紅O-固綠軟骨染色液

  供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生化試劑廠家

  規(guī)格:5×50ml/5×100ml

  分類:骨組織染色

  儲(chǔ)存條件:室溫,避光,6個(gè)月

  用途:軟骨染色

  注意事項(xiàng):主要由固綠染色液和番紅O染色液組成。染色時(shí),注意分化時(shí)間,否則容易導(dǎo)致過(guò)染或脫色

 

  【操作步驟

  1、標(biāo)本的處理:10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。

  2、常規(guī)脫蠟至水。

  3、入新鮮配制的Weigert染液染色3-5min。

  4、酸性乙醇分化液分化15s。

  5、蒸餾水洗1min。

  6、在固綠染色液內(nèi)浸染5min,蒸餾水洗1min。

  7、入SafraninOstain內(nèi)浸染1-2min,蒸餾水洗1min。

  8、用乙酸溶液洗滌切片1-2min,以便去除殘留的固綠,蒸餾水洗1min。

  9、分別用95%乙醇、無(wú)水乙醇脫水。

  10、二甲苯透明,光學(xué)樹脂封固。

 

  【注意事項(xiàng)

  1、需要顯示細(xì)胞核時(shí),盡量采用鐵蘇木素染色,其著色力強(qiáng)色調(diào)濃,一般的蘇木素著色力不強(qiáng)。

  2、Weigert蘇木素染液不可預(yù)先配制后放置,配制好后一般24h失去染色能力。

  3、切片在SafraninOstain中染色不宜過(guò)長(zhǎng),否則易導(dǎo)致背景的深紅色不易分化掉。

  4、切片分化時(shí)間應(yīng)恰當(dāng),以背景呈綠色為宜。

  5、SafraninOstain染色后,不宜在低濃度乙醇脫水,否則易褪色。

  6、95%乙醇脫水時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。

  7、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

  【染色原理

  改良番紅0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍(lán)色,與呈現(xiàn)紅色的軟骨對(duì)比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開(kāi)。番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽(yáng)離子染料,其顯示軟骨組織是基于陽(yáng)離子染料與多糖中陰離子基團(tuán)(硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素)結(jié)合。

  番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系,間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當(dāng)軟骨受到損傷時(shí),軟骨中的糖蛋白會(huì)釋放出來(lái),使基質(zhì)成分分布不均勻,從而導(dǎo)致番紅O淡染或不著色。通過(guò)圖像分析軟件可對(duì)番紅O染色的軟骨基質(zhì)進(jìn)行定量分析。固綠與膠原纖維結(jié)合,不宜褪色。番紅O-固綠染色的分化很關(guān)鍵,分化過(guò)度易導(dǎo)致切片不著色,分化不足易導(dǎo)致切片著色過(guò)深。

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