做細(xì)胞培養(yǎng)實驗經(jīng)常會對血清凍融，怎么才能有效正確的利用血清也有對應(yīng)的方法，今天分析如何融化血清讓實驗更好的完成。

與4℃過夜法相比,三步法為什么對血清更好呢？重點有二！

 

其一：關(guān)系到沉淀出現(xiàn)的幾率！

記得嗎？血清在融化過程中，瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲在下沉，如同蜂蜜溶于水時的亮線，這就是血清中大量的蛋白在快速融化，而水的熔點高于蛋白，融化的速度是比蛋白慢的。（回想一下高級冰淇淋和大棒冰的區(qū)別，你懂得！）試想，如果采用4℃過夜的方法，1瓶500毫升的血清融化好，大約需要10小時左右，蛋白先融化，沉降在瓶子的底部，水融化的速度比蛋白慢，于是造成大量蛋白溶于少量的水，此時就很容易有一些蛋白飽和析出，（大多是脂蛋白和纖連蛋白），這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。

采用三步法，只要2.5個小時，溫和有效地加快了水融化的速度，另一方面，融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子，讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間，而且大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。

血清融化過程中，蛋白質(zhì)會比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白

其二：血清在培養(yǎng)細(xì)胞中，重要的是利用它的活性的因子，因此，融化過程中大限度地保留因子的活性，就變得非常重要。回憶一下，細(xì)胞復(fù)蘇時，要保持細(xì)胞的活性，我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢？快融！血清同樣如此！三步法需要兩個半小時，4℃過夜需要大約10個小時（冰箱一般設(shè)2-8℃，所以各實驗室融化時間會稍有出入）。哪個速度對保留活性更好？不言而喻！