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細胞免疫熒光的詳細操作步驟

時間:2023-8-28閱讀:658
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細胞免疫熒光的詳細操作步驟

1,取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿里,PBS洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小,因此夾取的時候要小心。

2,4%多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。

3,0.2%Triton X 100通透10分鐘,PBS洗三遍。

4, 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。

5.,一抗4度濕盒內過夜,也可37度2小時,感覺前者效果好,PBS洗三遍。

6,二抗室溫2小時,或者37度1半小時,PBS洗三遍。

7,最好用DAPI染核,然后直接照熒光片。

8,蒸餾水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。





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