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大鼠(Human) p21 ELISA 檢測試劑盒資料

閱讀:321發布時間:2013-8-20

大鼠(Human)  p21  ELISA 檢測試劑盒試驗原理:
  p21試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知p21濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將p21和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中p21的濃度呈比例關系。
操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
試劑的準備
1、標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:

80 ng/ml

6號標準品)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

40 ng/ml

5號標準品)

100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

20 ng/ml

4號標準品)

100ul5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

10 ng/ml

3號標準品)

100ul4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

5.0 ng/ml

2號標準品)

100ul3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

2.5 ng/ml

1號標準品)

100ul2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

0 ng/ml

(空白對照)

原始濃度不用稀釋直接加入50ul

2、洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
大鼠(Human)  p21  ELISA 檢測試劑盒建議使用的實驗方案

標準品濃度(ng/ml

A

80

80

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

B

40

40

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

C

20

20

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

D

10

10

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

E

5.0

5.0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

F

2.5

2.5

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

G

0

0

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

H

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

樣品

大鼠(Human)  p21  ELISA 檢測試劑盒實驗結果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的p21標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的p21含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-80ng/ml
4、敏感度: 0.1 ng/ml


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