*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)過(guò)濾)。
4 ). *過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
產(chǎn)品名稱:?*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)
規(guī)格: 100管/96樣
測(cè)試方法:微量法
測(cè)定意義:GSH-Px是*氧化還原循環(huán)中催化還原型*(GSH)氧化的主要酶之一。GSH-Px不僅能夠特異地催化還原型*與ROS反應(yīng),生成氧化型*GSSG,從而保護(hù)生物膜免受ROS的損害,維持細(xì)胞的正常功能;而且具有保護(hù)肝臟、提高機(jī)體免疫力、拮抗有害金屬離子對(duì)機(jī)體的傷害和增加機(jī)體抗輻射等能力。
*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測(cè)。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至520nm,蒸餾水調(diào)零。
2、取0.5mL上清液(或稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品)+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二于有蓋試管中,置沸水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),每10min振蕩一次。
3、待冷卻后,在試管中加入1mL試劑三,振蕩30s,靜置片刻,使色素轉(zhuǎn)至試劑三;吸取0.8mL-1mL上層溶液于1mL玻璃比色皿中,用試劑三調(diào)零,于520nm波長(zhǎng)處比色,記錄吸光值。
4、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品吸光值和濃度,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2-氨基-5-氯苯腈 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
4-烯戊酸 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
三辛基甲基硫酸銨 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
4-氨基嘧啶 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
反,反-2,4-壬二烯醛 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
N-乙酰基哌啶-4-酰氯 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
2-氯-4-(三氟甲基)尼克酸 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
* 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
2-氨基-4-氯苯甲酸甲酯 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
4-甲基環(huán)已醇(順?lè)串悩?gòu)體混和物) 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
3-溴苯乙胺 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷三鹽酸鹽 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
異戊酸異丁酯 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
4-溴苯甲基溴 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
Z-谷安酸叔丁基酯 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
對(duì)氟苯乙酸乙酯 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
DL-10-樟腦磺酸 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
3-甲基戊酸乙酯 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
2-溴對(duì)苯二酸 分類: 化學(xué),化學(xué)生物學(xué),
* 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
4-甲基傘形酮酰-α-D-吡喃糖苷 分類: 試劑,碳水化合物,
4-甲基傘形酮酰-β-D-吡喃糖苷 分類: 試劑,碳水化合物,
豆腐果苷 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
獐牙菜苷 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
DL-蘋(píng)果酸鈣 分類: 試劑,碳水化合物,
重樓皂苷VII 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
山梨酸鉀 分類: 試劑,碳水化合物,
重樓皂苷VI 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
2-氯-4-硝基苯-α-L-巖藻糖苷 分類: 試劑,碳水化合物,
鼠尾草酚 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
重樓皂苷II 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
D-* 分類: 試劑,碳水化合物,
?*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)重樓皂苷I 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
檸檬酸鈉 分類: 試劑,碳水化合物,
小白菊內(nèi)酯 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
* 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
檸檬酸鈉 分類: 試劑,碳水化合物,
葫蘆巴堿鹽酸鹽 分類: 標(biāo)準(zhǔn)品,中藥標(biāo)準(zhǔn)品,
乳酸鋰 分類: 試劑,碳水化合物,
*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)ELISA實(shí)驗(yàn)*過(guò)氧化物酶(GPX)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)用規(guī)則
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。