elisa酶聯免疫試劑盒檢測原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗 （ ELISA ） 。 往預先包 被 α 干擾素 （ IFN- α ） 抗體的包被微孔中 ， 依次加入標本 、 標準品、 HRP 標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物 TMB 顯色 ，TMB 在過氧化物酶的催化下轉化成藍色 ， 并在酸的作用下轉化成zui終
的黃色 。 顏色的深淺和樣品中的 α 干擾素 （ IFN- α ） 呈 正相關 。 用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（ OD 值 ） ，計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清 ： 使用不含熱原和內毒素的試管 ， 操作過程中避免任何細胞刺激 ， 收集血液后 ， 3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿 ： EDTA 、 檸檬酸鹽或肝素抗凝 。 3000 轉離心 30 分鐘取上清 。
3. 細胞上清液： 3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿 ： 將組織加入適量生理鹽水搗碎 。 3000 轉離心 10 分鐘取上清。
5. 保存 ： 如果樣本收集后不及時檢測 ， 請按一次用量分裝 ， 凍存于-20 ℃ ，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍 。
操作注意事項
1. 試劑盒保存在 2-8 ℃ ，使用前室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中 ， 密封 （ 低溫干燥 ） 保存 。
3. 濃度為 0 的 S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋 5 倍，zui終結果乘以 5 才是樣本實際濃度 。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
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