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研究人員從小鼠胚胎中分別獲取了原代成纖維細胞和成肝細胞

閱讀:323發布時間:2017-7-18

elisa酶聯免疫試劑盒研究人員從小鼠胚胎中分別獲取了原代成纖維細胞和成肝細胞。他們將pRL-CMV質粒轉染到細胞內,以檢驗轉染效率。pRL-CMV來自Promega公司,它在CMV啟動子的控制下組成型表達海腎熒光素酶。因此,利用雙熒光素酶報告基因檢測系統可以確定轉染效率。
之后,研究人員又將這種組合應用在原代成肝細胞上。他們發現,盡管轉染效率有所提高,但是不如原代成纖維細胞那么顯著。此外,與單用FuGENE HD相比,試劑組合的使用降低了細胞活力。為此,他們優化了實驗,提高了細胞密度,使得結果改善。
本研究的一個目標是分離和鑒定MMVD或充血性心臟衰竭循環系統中的Ex-RNA表達水平。因為MMVD與衰老有關,研究人員還檢查了衰老相關指標。第二個目標是了解與血漿miRNA相比,從Ex-miRNA分離出的miRNA類別,以確定Ex-miRNA與疾病的相關程度。
研究顯示,轉錄激活蛋白結合靶基因前面的特定DNA序列,與RNA聚合酶形成魔術貼(Velcro)那樣的相互作用,穩定RNA聚合酶與DNA的接觸。轉錄激活蛋白與RNA聚合酶的互作可以分為兩個部分,首先轉錄激活蛋白幫助RNA聚合酶結合DNA雙螺旋,隨后轉錄激活蛋白幫助RNA聚合酶解開DNA雙螺旋,起始靶基因的轉錄。
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