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人皮膚成纖維細胞；CCC-HSF-1復(fù)蘇

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更新時間：2017-01-19 16:33:02瀏覽次數(shù)：270次

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產(chǎn)品簡介

人皮膚成纖維細胞；CCC-HSF-1復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人皮膚成纖維細胞；CCC-HSF-1復(fù)蘇	成纖維細胞樣	上海	3－5天

細胞名稱 人皮膚成纖維細胞；CCC-HSF-1復(fù)蘇
形態(tài)特性   成纖維細胞樣
生長特性貼壁生長
特征特性   取材自引產(chǎn)的15周胚胎組織，中國醫(yī)學(xué)*基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 P5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）

來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
FGFR substrate 3   英文名稱：   纖維母細胞生長因子受體底物3抗體   ?0.1ml
Fibronectin   英文名稱：   纖維連接蛋白抗體   ?0.1ml
FCHO1   英文名稱：   FCHO1蛋白抗體   ?0.2ml
phospho-FABP4 (Tyr20)   英文名稱：   磷酸化脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白   ?0.1ml
FABP12   英文名稱：   脂肪酸結(jié)合蛋白12抗體   ?0.2ml
FJX1   英文名稱：   四連接同源蛋白FJX1抗體   ?0.2ml
G gamma3   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體γ3抗體   ?0.2ml
G gamma7   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體γ7抗體   ?0.2ml
G protein alpha 13   英文名稱：   G蛋白結(jié)合蛋白α13/Gα13抗體   ?0.2ml
G protein alpha 16   英文名稱：   G蛋白結(jié)合蛋白α16/Gα16抗體   ?0.2ml
G protein alpha inhibitor 1   英文名稱：   G蛋白α抑制劑抗體   ?0.2ml
G Protein alpha x+z   英文名稱：   G蛋白受體α x+z抗體   ?0.2ml
GALC/Galactosylceramidase   英文名稱：   半乳糖神經(jīng)酰胺酶抗體   ?0.2ml
Phospho-Glycogen synthase 1(Ser640)   英文名稱：   磷酸化葡萄糖合成酶1抗體   ?0.1mlFA(Human Folic acid) ELISA Kit 人*   Multi-class antibodies   規(guī)格：   96T
ET(Human endotoxin) ELISA Kit 人內(nèi)毒素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
PPAR- Gamma(Human Peroxisome Proliferator-activated receptor Gamma) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
CsA(Human Cyclosporine A) ELISA Kit 人*A   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
GFAP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
15-LO/LOX(Human 15-lipoxygenase) ELISA Kit 人15脂加氧酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
CETP(Human glial fibrillary acidic protein) ELISA Kit 人*酯轉(zhuǎn)移蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
LTC4(Human Leukotriene C4) ELISA Kit 人白三烯C4   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Cyt-C(Human Cytochrome-C) ELISA Kit 人*   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
LPL(Human lipoprotein lipase) ELISA Kit 人脂蛋白脂酶   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶II   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
GP-MM(Human Glycogen phosphorylase MM) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶MM   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T