【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞；IMR-90使用說明書
形態特性 成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 W.W. Nichols及其同事從一位16周女嬰的肺中取材，建立了人二倍體成纖維細胞株IMR-90。 [22381] 分裂潛能，病毒感受性和其它性質都得到了充分研究，因而這株細胞可以作為WI-38或其它標準人肺細胞株的替代株。 有報道稱這株細胞在表現出衰老前可倍增58次。 [22381]
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(11+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
anti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人抗巨細胞病毒抗體IgM Multi-class antibodies 規格： 48T
anti-tox IgM(Human anti-toxoplasma IgG antibody) ELISA Kit 人抗弓形體IgM抗體 Multi-class antibodies 規格： 48T
anti-RV IgG(Human anti-rubella virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗風疹病毒IgG抗體 Multi-class antibodies 規格： 48T
EBV(Human anti-Epstein-Barr virus antibody) ELISA Kit 人抗EB病毒抗體 Multi-class antibodies 規格： 48T
PGR(Human progesterone receptor) ELISA Kit 人孕酮受體 Multi-class antibodies 規格： 48T
N-TSH(Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人新生兒促甲狀腺素 Multi-class antibodies 規格： 48T
SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit 人特異β1糖蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
PL(Human placetal lactogen) ELISA Kit 人胎盤泌乳素 Multi-class antibodies 規格： 48T
ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit 人雄激素結合蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
ATA(Human anti-trophoblast antibody,ATA ) ELISA Kit 人抗滋養膜細胞抗體 Multi-class antibodies 規格： 48T
aZP(Human anti-zona pellucida antibody,aZP) ELISA Kit 人抗透明帶抗體 Multi-class antibodies 規格： 48TGDPD3 英文名稱： 甘油磷酸二酯酶磷酸結構域3抗體 ?0.2ml
GGCT 英文名稱： γ-谷氨酰基環轉移酶抗體 ?0.2ml
GDF8 英文名稱： 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 ?0.2ml
VP3 Goose parvovirus 英文名稱： 鵝細小病毒GPV抗體 ?0.2ml
Gastrin 英文名稱： 胃泌素/蛙皮素抗體 ?0.1ml
GAPDH 英文名稱： 3-磷酸甘油醛脫氫酶（兔來源免疫組化用抗體） ?0.1ml
GDNF 英文名稱： 膠質細胞源神經營養因子抗體 ?0.1ml
Beta galactosidase 英文名稱： β半乳糖苷酶抗體 ?0.2ml
GABABR1 英文名稱： gamma氨基丁酸B型受體1抗體 ?0.2ml
G protein beta subunit GI 英文名稱： G蛋白/鳥苷酸結合蛋白抗體 ?0.2ml
GFRA4 英文名稱： GDNF家族受體α4抗體 GDNFRα4 ?0.2ml
