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人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C培養

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品       牌

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-20 09:28:08瀏覽次數:207次

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產品簡介

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C培養,細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C培養
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C培養
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞可用于血管內皮修復損傷的研究。 
培養條件    Medium 200 + LSGS
傳代方法  
傳代情況  P14
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  B類

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
GPR 151    英文名稱:    G蛋白偶聯受體151抗體    ?0.2ml
GPR77    英文名稱:    G蛋白偶聯受體77抗體    ?0.2ml
GDI1    英文名稱:    精神發育遲滯相關蛋白Rab GDI α抗體    ?0.2ml
GDPD1    英文名稱:    甘油磷酸二酯酶磷酸結構域4抗體    ?0.2ml
GFPT2    英文名稱:    D-果糖6磷酸轉移酶2抗體    ?0.2ml
GABPA    英文名稱:    GA結合蛋白轉錄因子α/GABP-α抗體    ?0.2ml
GABPB2    英文名稱:    GA結合蛋白轉錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體    ?0.2ml
GAD65 + GAD67    英文名稱:    *脫羧酶65+*脫羧酶67抗體    ?0.1ml
GADL1    英文名稱:    *脫羧酶樣蛋白1抗體    ?0.2ml
G6PC3    英文名稱:    葡萄糖-6-磷酸酶3/G6Pase-β抗體    ?0.2mlC1q(Human Complement 1q) ELISA Kit  人補體1q    Multi-class antibodies    規格:     48T
GP- IV (Human plaet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit  人血小板膜糖蛋白Ⅳ    Multi-class antibodies    規格:     48T
Human Thymosin Alpha1 ELISA Kit  人*α1    Multi-class antibodies    規格:     48T
CCP(Human complement control protein) ELISA Kit  人補體調節蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
PBP/CXCL7(Human plaet basic protein) ELISA Kit  人血小板堿蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
HLA-C(Human leukocyte antigen C) ELISA Kit  人類白細胞抗原C    Multi-class antibodies    規格:     48T
HLA-E(Human leukocyte antigen E) ELISA Kit  人類白細胞抗原E    Multi-class antibodies    規格:     48T
HLA-A(Human leukocyte antigen A) ELISA Kit  人類白細胞抗原A    Multi-class antibodies    規格:     48T
SAP(Human Serum amyloid P) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白P    Multi-class antibodies    規格:     48T
MBLR(Human Mannma binding lectin receptor) ELISA Kit  人甘露糖凝集素受體    Multi-class antibodies    規格:     48T
PL/Fbn(Human plasmin/fibrinolysin) ELISA Kit  人纖溶酶/纖維蛋白溶酶    Multi-class antibodies    規格:     48T

 

 


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