抗鼠CD8單克隆細(xì)胞；YTS 169.4.2.1培養(yǎng)

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更新時(shí)間：2017-02-04 13:44:27瀏覽次數(shù)：146次

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產(chǎn)品簡介

抗鼠CD8單克隆細(xì)胞；YTS 169.4.2.1培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 抗鼠CD8單克隆細(xì)胞；YTS 169.4.2.1培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性半貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞分佖CD8不同抗原決定簇單抗，用于CD8單抗的制備。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR   STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱	抗鼠CD8單克隆細(xì)胞；YTS 169.4.2.1培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
紫堇Cordalis bungeana Turez.   Corynoline   紫堇靈   18797-79-0   C21H21NO5   ≥98%
紫金牛科的百兩金 Crispaeaf Ardisia Root   Ardisiacrispin A   百兩金素A   23643-61-0   C52H84O22   ≥98%
紫花魚燈草Corydalis incisa   Bulbocapnine   球紫堇堿   298-45-3   C19H19NO4   ≥98%
紫花前胡Peucedani Decursivi Radix   Nodakenin   紫花前胡苷   495-31-8   C20H24O9   ≥98%
紫草Radix Arnebiae   Propionylshikonin   丙酰紫草素   162283-70-7   C19H20O6   ≥98%
梓Catalpa ovata   Deoxylapachol   去氧拉巴醌   3568-90-9   C15H14O2   ≥95%
梓Catalpa ovata   1-Hydroxy-2-prenylnaphthalene   2-異戊烯基-1-萘酚   16274-34-3   C15H16O   ≥95%
梓Catalpa ovata   3-Hydroxycatalponol   3-羥基梓酚   265644-24-4   C15H18O3   ≥95%
梓Catalpa ovata   9-Hydroxy-alpha-lapachone   9-羥基-ALPHA-拉杷醌   22333-58-0   C15H14O4   ≥95%
梓Catalpa ovata   9-Methoxy-α-lapachone   9-甲氧基-ALPHA-拉帕醌   35241-80-6   C16H16O4   ≥95%
梓Catalpa ovata   Lapachol   黃鐘花醌   84-79-7   C15H14O3   ≥98%OAS3   2'-5'-寡腺苷酸合成酶3抗體
OSR2   牙齒發(fā)育相關(guān)蛋白Osr2抗體
Oct-4B(OCT4B-190)NT   胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白190抗體(N端)
ORC1L   起始識別復(fù)合蛋白亞基1抗體
OTUB   泛素特異蛋白酶Otubain2抗體
Oligophrenin 1   精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Oligophrenin-1抗體
OGFOD2   末端多聚腺苷酸2蛋白抗體
ORAV1   口腔癌高表達(dá)的蛋白1抗體
ORP4   氧化固醇結(jié)合蛋白4抗體
OLFM4   抗細(xì)胞凋亡蛋白OLFM44抗體
OCC1   結(jié)腸癌過度表達(dá)蛋白1抗體
OCIAD2   卵巢癌免疫反應(yīng)抗原抗體
OVCA1   卵巢癌相關(guān)基因1抗體

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