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小鼠雜交瘤細胞；S-9-11培養(yǎng)

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更新時間：2017-02-06 11:00:11瀏覽次數(shù)：168次

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產(chǎn)品簡介

小鼠雜交瘤細胞；S-9-11培養(yǎng)細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細介紹

產(chǎn)品名稱	小鼠雜交瘤細胞；S-9-11培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞；S-9-11培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性半貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限未定

復蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
漿果楝Cipadessa baccifera   Aglinin A   none   246868-97-3   C30H50O5   ≥97.5%
漿果楝Cipadessa baccifera   Cabraleadiol 3-acetate   3-乙酸南美楝屬二醇酯   35833-62-6   C32H54O4   ≥95%
漿果楝Cipadessa baccifera   Eichlerianic acid   none   56421-13-7   C30H50O4   ≥98.5%
漿果楝Cipadessa baccifera   Ergosta-5,24(28)-diene-3,7,16-triol   麥角甾-5,24(28)-二烯-3,7,16-三醇   289054-34-8   C28H46O3   ≥95%
漿果楝Cipadessa baccifera   3-Methoxyfuran   3-甲氧基呋喃   3420-57-3   C5H6O2   ≥99%
姜黃 Curcuma longa L.   Bisdemethoxycurcumin   雙去氧基姜黃素   33171-05-0   C19H16O4   ≥98%
姜黃 Curcuma longa L.   Curcumin   姜黃素   458-37-7   C21H20O6   ≥98%
姜黃 Curcuma longa L.   Curdione   莪術(shù)二酮   13657-68-6   C15H24O2   ≥98%
姜黃 Curcuma longa L.   Demethoxycurcumin   去甲氧基姜黃素   297160-27-1   C20H18O5   ≥98%
姜黃 Curcuma longa L.   Tetrahydrocucumin   四氫姜黃素   36062-04-1   C21H24O6   ≥98%
姜 Zingiber Officinale rose   10-Gingerol   10-姜酚   23513-15-7   C21H34O4   ≥98%
姜 Zingiber Officinale rose   6-Gingerol   6-姜酚   23513-14-6   C17H26O4   ≥98%TRIM41   環(huán)指蛋白調(diào)節(jié)蛋白激酶C蛋白抗體
TRIM50   TRIM50蛋白抗體
RNF88   環(huán)指蛋白88抗體
TRIAD3   鋅指蛋白抑制NFκB蛋白抗體
RNF98   環(huán)指蛋白98抗體
RNF16   環(huán)指蛋白16抗體
RNF105   環(huán)指蛋白105抗體
RNF125   環(huán)指蛋白125抗體
Thrombin heavy chain   *(*II)重鏈抗體
TGF Beta R3   轉(zhuǎn)移生長因子β受體3抗體（TGF-βRⅢ，TGFβRⅢ）
TRPV1   辣椒素受體抗體
TNFAIP1   腫瘤壞死因子α誘導蛋白1抗體
Thymosin Alpha-1   *α1抗體
TIMP-4   金屬蛋白酶組織抑制因子-4抗體
TIMP-1(NT)   金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體（N端）
TIMP-2   金屬蛋白酶組織抑制因子-2抗體
T4/L-Thyroxine   甲狀腺素T4抗體
TIGAR   TIGAR蛋白抗體