雜交瘤細(xì)胞株；AFM1/3D8特性來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞名稱(chēng) 雜交瘤細(xì)胞株；AFM1/3D8特性
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 懸浮生長(zhǎng) | 上海 | 3－5天 |
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
綿羊骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA Kit ，英文名： Sheep Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊睪酮(T)ELISA Kit ，英文名： Sheep Testosterone(T)ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA Kit ，英文名： Sheep Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA Kit ，英文名： Sheep pulmonary surfactant-associated protein C,SP-C ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA Kit ，英文名： Sheep pulmonary surfactant-associated protein B,SP-B ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA Kit ，英文名： Sheep non-ester fatty acid,NEFA ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊二醇受體(ER-Alpha)ELISA Kit ，英文名： Sheep Estradiol Receptor Alpha,ER-Alpha ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊彈性蛋白酶2,中性粒細(xì)胞(ELA2)ELISA Kit ，英文名： Sheep elastase 2,neutrophil(ELA2)ELISA kit ，規(guī)格： 48T/96T
綿羊催產(chǎn)素(OT)ELISA Kit ，英文名： Sheep oxytocin,OT ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T1,8-Naphthalic anhydride 1H,3H-萘并[1,8-CD]吡喃-1,3-二酮 25克 AR，90%
1,8-Dihydroxyanthraquinone 1,8-二羥基-9,10-蒽二酮 100克 AR，99.5%
1,8-ANS N-苯基-8-萘胺-1-磺酸 5克 高純
1,7-Diaminoheptane 1,7-二氨基庚烷 500毫克 BR
1,6-Hexanediamine 己烷二胺 25克 5N
1,5-Naphthalene disulfonic acid 阿姆斯特朗酸 1克 高純，98%
1,5-Dihydroxynaphthalene 1,5-萘二酚 1毫克 AR，10%
1，4-Phenylenediamine dihydrochloride 鹽酸對(duì)苯二胺 500克 超純，99%
1,4-Dihydroxynaphthalene 1,4-萘二酚 1毫克 AR，98%
1,4-Butyrolactone γ-丁內(nèi)酯 1克 CP，98%
1,3-Propanediol 1,3--二羥基丙烷 100克 農(nóng)殘級(jí)，99.9%
1,3-Diphenylurea N,N'-二苯基脲 25克 SP
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