干細胞的凍存方法
1.材料：生長良好之培養(yǎng)細胞、新鮮培養(yǎng)基、DMSO(Sigma D-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene 5000-0020)、0.4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球計數(shù)盤與蓋玻片、等速降溫機(KRYO10SeriesII)。
2.冷凍保存方法：
(1)傳統(tǒng)方法：冷存管置于4℃10分鐘→ -20℃30分鐘→ -80℃16～18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
(2)程序降溫：利用已設(shè)定程序的等速降溫機以-1～-3℃/分鐘之速度由室溫降至(-80℃以下)-120℃，再放在液氮槽vaporphase長期儲存。適用于懸浮型細胞與hybridoma之保存。
3.步驟：
(1)冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基，觀察細胞生長情形。
(2)配制冷凍保存溶液(使用前配制)：將DMSO加入新鮮培養(yǎng)基中，zui后濃度為5～10%，混合均勻，置于室溫下待用。
(3)依細胞繼代培養(yǎng)之操作，收集培養(yǎng)之細胞，取少量細胞懸浮液(約0.1ml)計數(shù)細胞濃度及凍前存活率。
(4)離心，去除上清液，加入適量冷凍保存溶液，使干細胞濃度為1～5×106Cells/ml，混合均勻，分裝于已標示*之冷凍保存管中，1ml/vial，并取少量細胞懸浮液作污染檢測。
說明書 CAS號： 111-50-2 己二酰氯
報價 CAS號： 111-62-6 油酸乙酯
進口、國產(chǎn) CAS號： 111771-08-5 2-氟-6-碘苯甲酸
現(xiàn)貨供應 CAS號： 111-83-1 1-溴辛烷
說明書 CAS號： 1118-89-4 L-*二乙酯鹽酸鹽
報價 CAS號： 1118-90-7 L-2-氨基己二酸
進口、國產(chǎn) CAS號： 1119-62-6 3,3'-二氫氧啉酸
現(xiàn)貨供應 CAS號： 1119-94-4 月桂基*基*
報價 CAS號： 112068-01-6 (S)-(+)-alpha,alpha-二苯基脯氨醇
進口、國產(chǎn) CAS號： 1121-22-8 反式-1,2-環(huán)己二胺
現(xiàn)貨供應 CAS號： 1121-24-0 2-羥基苯硫酚
說明書 CAS號： 1121-25-1 3-羥基-2-甲基吡啶
報價 CAS號： 112-13-0 癸酰氯
進口、國產(chǎn) CAS號： 112-16-3 月桂酰氯
現(xiàn)貨供應 CAS號： 112197-15-6 3-碘-2-甲氧基吡啶
說明書 CAS號： 112204-58-7 5-溴-2-氟*
干細胞
