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干細胞實驗應(yīng)了解的規(guī)則

閱讀:441發(fā)布時間:2017-11-13

干細胞實驗應(yīng)了解的規(guī)則:
a)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),每個標準品和空白孔建議做復孔,每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
b)將所有試劑盒充分混勻,不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
c)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,重復此操作3次,如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
d)加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),立即加入50ul的*標記的抗體,蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
e)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
f)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
g)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘,避免光照。
h)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,重復此操作3次,如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
i)在450nm波長處測定各孔的OD值。
干細胞HASMC tRNA    人主動脈平滑肌細胞總RNA    10 µg
HCM tRNA    人心肌細胞總RNA    10 µg
HCM-a tRNA    人心肌細胞-成人總RNA    10 µg
HCF tRNA    人心臟成纖維細胞總RNA    10 µg
HCF-av tRNA    人心肌細胞-成人心室總RNA    10 µg
HCF-aa tRNA    人心肌細胞-成人心房總RNA    10 µg
HCEpiC tRNA    人角膜上皮細胞總RNA    10 µg
HK tRNA    人角膜細胞總RNA    10 µg
HRPEpiC tRNA    人視網(wǎng)膜色素上皮細胞總RNA    10 µg
HLEpiC tRNA    人晶狀體上皮細胞總RNA    10 µg
HIPEpiC tRNA    人虹膜色素上皮細胞總RNA    10 µg
HConF tRNA    人結(jié)膜成纖維細胞總RNA    10 µg
HNPCEpiC tRNA    人無色素睫狀上皮細胞總RNA    10 µg
HTMC tRNA    人小梁網(wǎng)細胞總RNA    10 µg
HAmEpiC tRNA    人羊膜上皮細胞總RNA    10 µg
HVT tRNA    人滋養(yǎng)層絨毛細胞總RNA    10 µg
HVMF tRNA    人絨毛間葉成纖維細胞總RNA    10 µg
HPA-v tRNA    人前脂肪細胞-內(nèi)臟總RNA    10 µg
HPA-s tRNA    人前脂肪細胞-皮下總RNA    10 µg
HMSC-bm tRNA    人間充質(zhì)干細胞-骨髓總RNA    10 µg
HMSC-ad tRNA    人間充質(zhì)干細胞-脂肪總RNA    10 µg
HMSC-hp tRNA    人間充質(zhì)干細胞-肝臟總RNA    10 µg
HUMSC tRNA    人臍帶間充質(zhì)干細胞總RNA    10 µg
HPMSC tRNA    人肺間充質(zhì)干細胞總RNA    10 µg
HMEpiC tRNA    人上皮細胞總RNA    10 µg干細胞

 

 


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