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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存
1.細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2.細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3.血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5.體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
7.樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8.保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意事項:
1.實(shí)驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2.加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,
否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響實(shí)驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3.孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行。
4.反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5.建議實(shí)驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6.建議使用本試劑盒時先做預(yù)實(shí)驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商,如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒進(jìn)口、國產(chǎn) ELISA Kit for Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor (TAFI) 纖溶抑制因子(TAFI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
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雞17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
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