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DNA 尿素 -PAGE 上樣液10mL實驗方法

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更新時間:2017-01-17 14:11:24瀏覽次數:328次

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產品簡介

DNA 尿素 -PAGE 上樣液10mL實驗方法運輸及保存 常溫運輸、4℃保存(miRNAon、miRNA Marker 需要-20C 保存)。保存期為一年。

詳細介紹

DNA 尿素 -PAGE 上樣液10mL實驗方法產品介紹:

DNA 尿素 -PAGE 上樣液10mL實驗方法使用方法:
一、準備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產品的使用手冊)。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。 3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠 1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分 (此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例):

4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。

產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
〖英文名稱〗:β-D-Glucan
〖其他名稱〗:β-D-葡聚糖
〖CAS號〗:9041-22-9
分子式:(C6H10O5)n
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥80.0%(HPLC)
〖干燥失重〗:≤3.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色或類白色或黃褐色粉末。酵母來源,溶于水
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。
〖保存〗:2~8℃
肽聚糖
〖英文名稱〗:PGN;Peptidoglycan
〖CAS號〗:27814-48-8
分子式:(C6H10O5)n

四硫磺酸鈉亮綠增菌液基礎(TTB)23040250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養(GB4789.4-2002)。
Simmons 檸檬酸鹽瓊脂 (CM0155) Oxoid incubation media Simmons 檸檬酸鹽瓊脂 (CM0155) Oxoid
缺陷短波單胞菌 腐乳菌 支/瓶
R2AAgar
大豆酪蛋白消化物培養基 250g 一種通用的微生物培養基,用于多種微生物的培養(USP標準)
四硫磺酸鈉煌綠增菌液基礎(TTB)2303g用于沙門氏菌選擇性增菌培養(《中華人民共和國藥典》20。
滴蟲培養基基礎 (CM0161) Oxoid incubation media 滴蟲培養基基礎 (CM0161) Oxoid
熱帶假絲酵母 產生蛋白酶(腐乳菌) 支/瓶
TGE培養基250g用于細菌總數測定
SoybeanCaseinDigestMedium
孔雀綠增菌液(MM)23030250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養
脫氧膽酸鹽瓊脂 (CM0163) Oxoid incubation media 脫氧膽酸鹽瓊脂 (CM0163) Oxoid
熱帶靈芝 支/瓶
TGEMedium
PH7.0緩沖鈉蛋白胨溶液 250g 用于藥品中細菌的前增菌或樣品制備
麥康凱瓊脂NO.323020250g用于食品和環境樣本中沙門氏菌(傷*除外)的選擇性增菌培養(GB/T4789.28-2003中4...
布魯氏培養基基礎 (CM0169) Oxoid incubation media 布魯氏培養基基礎 (CM0169) Oxoid
人蒼白桿菌 模式菌株 支/瓶
CVT瓊脂250g用于乳制品中嗜冷菌的計數
大豆酪蛋白消化物瓊脂培養基 250g 用于藥品中需氧菌總數測定
弧菌顯色培養基選擇性添加劑凍干試劑SR03支每支添加于(CRM008)弧菌顯色培養基中。
液體巰基醋酸鹽培養基 (USP) (CM0173) Oxoid incubation media 液體巰基醋酸鹽培養基 (USP) (CM0173) Oxoid
忍冬木層孔菌 病原菌。 支/瓶
CVTAgar
SoybeanCaseinDigestAgarMedium
葡萄糖肉湯28060250g用于細菌培養,特別是檢測一次性使用衛生用品中溶血性鏈球菌(GB-2002)及檢測腸桿菌產氣。
Todd-Hewitt 肉湯 (CM0189) Oxoid incubation media Todd-Hewitt 肉湯 (CM0189) Oxoid
日本根霉 用葡萄糖、纖維糖酒精。 支/瓶
酵母粉瓊脂250g用于水中細菌總數的檢測(ISO標準)
液體連四鹽培養基 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養。
匹克氏肉湯基礎24090用于溶血性鏈球菌的增菌培養(參考GB/T4789.28-2003中4.62,GB/T4789.03)。
賴氨酸培養基 (CM0191) Oxoid incubation media 賴氨酸培養基 (CM0191) Oxoid
日勾維腸桿菌 腐乳。 支/瓶
YeastExtractAgar
FluidTetrathionateMedium
腸桿菌的分離培養。
*


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