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電泳級 SYBR Green I50μL實驗步驟

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更新時間:2017-01-17 14:13:56瀏覽次數:317次

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產品簡介

電泳級 SYBR Green I50μL實驗步驟運輸及保存 常溫運輸、4℃保存(miRNAon、miRNA Marker 需要-20C 保存)。保存期為一年。

詳細介紹

電泳級 SYBR Green I50μL實驗步驟產品介紹:

電泳級 SYBR Green I50μL實驗步驟使用方法:
一、準備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺面和器皿(詳見該產品的使用手冊)。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。 3. 配制 10%過硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時間不要超過一周。
二、配制凝膠 1. 估計所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分 (此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例):

4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會降低聚合反應效率)。但如果實驗條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來。

電泳級 SYBR Green I50μL實驗步驟產品及特點:
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開即用,十分方便,免去了 實驗人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對長度各異 的 RNA 進行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
L-來蘇糖
〖英文名稱〗:L-(+)-Lyxose;L-Lyxopyranose
〖其他名稱〗:L-異木糖;L(-)-來蘇糖;L-膠木糖;來蘇糖;L-谷胺酸酯
〖CAS號〗:1949-78-6
C5H10O5=150.13
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥99.0%
〖比旋光度〗:+13~+15o(C=1,H2O)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:五碳糖(戊糖)中醛糖之一。〖熔點〗:108~112℃
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
松二糖
〖英文名稱〗:D-(+)-Turanose;3-O-α-D-Glucopyranosyl-D-fructose
〖其他名稱〗:D(+)-松二糖;土耳其干羅糖;土冉糖
〖CAS號〗:547-25-1
C12H22O11=342.30

電泳級 SYBR Green I50μL實驗步驟四硫磺酸鈉亮綠增菌液SR00502X5支含液2ml/支和煌綠,2支添加于(02303TTB
改良Czapek Dox 瓊脂 (CM0097) Oxoid incubation media 改良Czapek Dox 瓊脂 (CM0097) Oxoid
匍匐放射霉或雅致放線霉 支/瓶
菌落總數檢測培養基-
PseudomonasAgarMediumforDetectionofPyocyanin
四硫磺酸鈉煌綠增菌液SR00402X5支含液2ml/支和煌綠,2支添加于(023030)中配成TTB
SS 瓊脂 (CM0099) Oxoid incubation media SS 瓊脂 (CM0099) Oxoid
菩提奇異球菌 食用 支/瓶
TTC營養瓊脂250g用于細菌總數測定
液體乳糖培養基 250g 用于食品中沙門氏菌檢驗前增菌培養。
麥康凱瓊脂2250g供分離發酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌(GB/T4789.28-2003中4.24和GB/T4789.5-2003)。
玉米粉瓊脂 (CM0103) Oxoid incubation media 玉米粉瓊脂 (CM0103) Oxoid
葡萄孢 防霉試驗菌 支/瓶
TTCNutrientAgar
ChinaBlueAgar
XLD瓊脂培養基29999250g用于臨床標本及食品中志賀氏、沙門氏菌選擇性分離。(GB4789.4-2008,FDABAMchapter5,ISO657...
紫紅膽汁 (乳糖) 瓊脂 (CM0107) Oxoid incubation media 紫紅膽汁 (乳糖) 瓊脂 (CM0107) Oxoid
葡萄芽假絲酵母 支/瓶
營養肉湯(NB)250g一般細菌培養,轉種,復壯,增菌等(GB標準)
液體亞西酸鹽*培養基 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養
亞利桑那菌瓊脂(SA)2300g用于亞利桑那菌選擇性分離培養。(SN02)
2號麥康凱瓊脂(CM0109) Oxoid incubation media 2號麥康凱瓊脂(CM0109) Oxoid
普雷恩霉 強化酵淀粉糖化液,酒精及白酒酵母 支/瓶
NutrientBroth
連四鹽培養基 250g 用于沙門氏菌選擇性增菌培養。
沙門氏菌和某些志賀氏菌的


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