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上海邦景實業有限公司
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dNTP 溶液,100mM 5mL原理運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。
dNTP 溶液,100mM 5mL原理產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
dNTP 溶液,100mM 5mL原理產品介紹:合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
C3H5KO3=128.17
〖級別〗:AR
〖含量〗:≥60%水溶液
密度(20℃):1.32~1.35g/ml
〖重金屬〗:≤0.001%
〖氯化物〗:≤0.05%
〖鐵〗鹽:≤0.001%
〖硫酸鹽〗:≤0.005%
鈣鹽:≤0.002%
〖〖砷〗鹽〗:≤0.0002%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:無色或微黃色、微粘性澄清液體,無味或輕微特殊氣味
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
檸檬酸〖鋅〗
〖英文名稱〗:Zinc citrate;Zinc chromate(VI)
〖其他名稱〗:枸櫞酸〖鋅〗;〖鋅〗鉻黃;〖鋅〗黃;2-羥基-1,2,3-丙烷*酸〖鋅〗鹽;檸檬酸三〖鋅〗;2-羥基丙烷-1,2,3-三羧酸〖鋅〗
〖CAS號〗:546-46-3
1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷 Catalase( 抗氧化酶 )
* CuZn/Mn-SOD 活性檢測試劑盒 (WST 法 )
碘乙酸 GSH—PX 測試盒
* GSH—ST 測試盒
秋水仙素 GSH 和 GSSG 試劑盒
交聯瓊脂糖凝膠 2B GSH 試劑盒 ( *測試盒 )( 比色法 )
丙烯葡聚糖凝膠 S-100 HR H5N1 神經氨酸酶抑制劑鑒定試劑盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-200 HR NF-κB 激活-核轉運檢測試劑盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-300 HR ROS 活性氧檢測試劑盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-400 HR 丙二醛測試盒 / 脂質過氧化物測試盒
丙烯葡聚糖凝膠 S-500 HR 超微量 ATP 酶測試盒 (Na+K+、Ca2+Mg2+ATPase)
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