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Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg說明書

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-19 14:59:57瀏覽次數(shù):611次

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產(chǎn)品簡介

Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg說明書運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。

詳細介紹

Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg說明書產(chǎn)品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標記等。
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg說明書產(chǎn)品介紹:

Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg說明書合成建文庫用的 1st-strand cDNA:

1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg說明書按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現(xiàn)多個小片段)。

C12H10N2O=198.22
〖級別〗:BR
純度:≥98.0%
〖熔點〗:150~155℃
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:黃色或橙色至橙棕色棱柱體結(jié)晶或粉末。易溶于乙醇和乙迷,溶于苯,溶于稀堿溶液及濃硫酸中成黃色溶液,不溶于水?!既埸c〗155~157℃。沸點220~230℃(2.66kPA)。zui大吸收波長 347nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)非水滴定用酸堿指示劑。
〖保存〗:RT,避光
熒光桃紅B
〖英文名稱〗:Phloxine B ;Tetrachlorotetrabromofluororescein sodium salt;Phloxine;Acid red 92;Eosin 10B;Tetrabromotetrachlorofluorescein disodium salt;3,4,5,6-Tetrachloro-2′,4′,5′,7′-tetrabromofluorescein sodium salt;C.I. 45410
〖其他名稱〗:酸性紅92;熒光桃紅;四溴四氯熒光素;焰紅B;石南紅;玫瑰紅;焰紅染料B;標記紅;2’,4’,5’,7’-四溴-4,5,6,7-四氯-3’,6’-二羥基-螺[異苯并呋喃-1(3H),9’-(9H)占噸]-3-酮;紅色28
〖CAS號〗:18472-87-2
C20H2Br4Cl4Na2O5=829.63
〖級別〗:IND
〖含量〗:≥80.0%
λmax:536~540nm(0.02 mol/L 醋酸銨溶液)
干燥失量:≤10.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:磚紅色或棕紅色至暗棕色粉末。溶于水為藍紅色溶液帶微深綠色熒光,溶于乙醇為藍紅色溶液帶磚紅色熒光,在鹽酸中加溫時生成棕黃色沉淀,在氫氧中生成藍色沉淀,在濃硫酸中呈黃色溶液,加熱時不發(fā)生變化,稀釋時產(chǎn)生黃紅色沉淀。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色。吸附指示劑。熒光指示劑。檢定汞。用于Mallory's 熒光桃紅-亞甲基藍染色;Kreyberg's 方法用于角質(zhì)素和粘液

Oligo dT12-18 引物,0.5μg/μL5μg說明書一步式廣譜 DNAout    小鼠抗 SUMO 標簽蛋白單抗
高 GC DNA 清除劑,PCR     HRP 標記內(nèi)參抗體 (β-actin)
一步式 PAGE 染液    HRP 標記內(nèi)參抗體 (GAPDH)
血清白蛋白清除劑    HRP 標記內(nèi)參抗體 (β-Tubulin)
蛋白質(zhì)電泳分子量標準 (3.3-20.1KD)    雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒
蛋白質(zhì)電泳分子量標準 (14.4-97.4KD)    熒光染色細胞凋亡檢測試劑盒
蛋白質(zhì)電泳分子量標準 (43.0-200.0KD)    螢火蟲熒光素酶報告基因檢測試劑盒
核酸印跡膜染液    海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒
柱式酵母質(zhì)粒 DNAout    β- 半乳糖苷酶檢測試劑盒
一步離心式石蠟清除劑    DNA 修復(fù)混合液 
綠如藍核酸染料 (UV)    DNA 修復(fù)混合液 
綠如藍核酸染料 (UV)    Vent DNA 聚合酶
軟骨 RNAout    即用型多重 PCR 試劑盒
14.4-97.4KD)


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