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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-19 16:39:34瀏覽次數(shù):502次
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鏈霉菌 PCR Mix 6100 次實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
鏈霉菌 PCR Mix 6100 次實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
鏈霉菌 PCR Mix 6100 次實(shí)驗(yàn)步驟合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
〖CAS號〗:5486-84-0
C17H18N3O3Cl ? 1/2ZnCl2=415.94
〖級別〗:For microscopy
有效分光〖含量〗:≥35.0%
〖含量〗(以Zn計(jì)):≥7.5%
吸光度試驗(yàn):合格
薄層層析試驗(yàn):合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:淺米紅色或黃綠色粉末,對光敏感,〖熔點(diǎn)〗 157℃(分解)。zui大吸收波長 395nm
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)測定脂酶及堿性磷酸酶。用于顯微鏡
〖保存〗:-20℃,避光
固藍(lán)RR鹽
〖英文名稱〗:Fast blue RR salt;Azoicdiazo No.24;Diazonium salt of 4-benzoyl amino-2,5-dimethoxyaniline;4-Benzoylamino-2,5-dimethoxybenzene diazonium chloride hemi[zinc chloride]salt;4-Amino-2,5-dimethoxybenzanilide diazotated zinc double salt
〖其他名稱〗:重氮堅(jiān)牢藍(lán);堅(jiān)牢藍(lán)RR鹽;重氮固藍(lán)RR;4-苯甲酰氨基-2,5-二甲氧基氯化重氮苯氯化〖鋅〗鹽;耐曬蘭RR鹽
〖CAS號〗:14726-29-5
C15H14ClN3O3?1/2ZnCl2=387.89
〖級別〗:BR
GAPDH 小鼠單抗 細(xì)菌 RNAout
植物 Actin 小鼠單抗 細(xì)菌蛋白酶抑制劑
植物 Actin 小鼠單抗 細(xì)菌膜蛋白質(zhì)微量提取試劑盒
組蛋白 3.1 小鼠單抗 細(xì)菌總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒
組蛋白 3.1 小鼠單抗 蝦堿性磷酸酶
COX IV 兔單抗 *
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗 *溶液 ,100mg/mL
小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗 纖連蛋白 ( 人血 )
小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗 纖維蛋白原
小鼠抗 Flag 標(biāo)簽單抗 纖維二糖
小鼠抗 c-Myc 標(biāo)簽單抗 纖維素 DE-52
小鼠抗 c-Myc 標(biāo)簽單抗 纖維素酶
小鼠抗 HA 標(biāo)簽單抗 顯影定影套裝
小鼠抗 HA 標(biāo)簽單抗 顯影粉
小鼠抗 GST 標(biāo)簽單抗 線狀 DNA 清除劑
小鼠抗 GST 標(biāo)簽單抗 腺苷
小鼠抗 V5 標(biāo)簽單抗 腺苷脫氨酶
小鼠 R
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