克必隆零背景 T 載體20 次實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品利用 Taq DNA polymerase 的不依賴于模板的末端轉(zhuǎn)移酶活性, 在只有 dATP 存在的情況下,在平末端的 DNA 片段加上一個(gè) dA 尾巴,使平 末端片段也能被 T 載體克隆。
1. 簡(jiǎn)單,2 X Tailing Buffer 中含有所需要的所有成分,不需要單獨(dú)準(zhǔn)備。
2. 適用于任何平末端的 DNA 片段,包括 Pfu DNA polymerase 等酶合成 的 DNA 片段。
3. 產(chǎn)物可以直接用于與 T 載體的連接。
克必隆零背景 T 載體20 次實(shí)驗(yàn)方法使用方法:
一:反應(yīng)前純化處理: 用 Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo 等具有 3 到 5 外切活性的 DNA 聚合酶 擴(kuò)增得到的 DNA 片段,必須經(jīng)過*的去除殘留的酶的處理過程(如酚/抽提或 Proteinase K 處理),否則它們將在加 A 反應(yīng)時(shí),切除掉加上的 A 尾巴,干擾反應(yīng)。可以采取膠回收和酚/抽提法等常規(guī)方法純化,zui后溶 解在水或 TE 中,終濃度以 0.1 ug/uL 為宜。
二:加 A 反應(yīng) 在干凈的 0.5 mL 或 1.5 mL 離心管中,分別加入下列成分: 回收的 DNA 片段(0.2-2 ug) 25 uL 2 X dA Tailing Buffer 1 uL Taq DNA polymerase(5 U/uL) 補(bǔ)水到 50 uL 72℃保溫 2 小時(shí) 三:反應(yīng)后處理 加 A 反應(yīng)后,Taq DNA polymerase 將與 DNA 末端緊密結(jié)合,所以必 須酚/抽提去除。如果使用 Proteinase K 處理后再用酚/抽提效果會(huì) 更好。得到的 DNA 溶于適量水和 TE 中后即可用于 T 載體的連接反應(yīng)。
產(chǎn)品介紹:

〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
天青A
〖英文名稱〗:Azure A chloride salt;3-Amino-7-dimethylaminophenothiazin-5-ium chloride;N-(7-Amino-3H-phenothiazin-3-ylidene)-N-methylmethanaminium chloride
〖其他名稱〗:3-氨基-7-二甲基氨基吩噻嗪-5-鎓〖氯化物〗;7-(二甲基)-3-亞胺基-3H-分噻嗪鹽酸;天青色;天藍(lán)色;淡青色
〖CAS號(hào)〗:531-53-3
C14H14ClN3S=291.80
〖級(jí)別〗:BS
生物染色試驗(yàn):合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:綠色結(jié)晶或暗褐色粉末。溶于水、甲醇,不溶于醚。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)生物染色劑,顯微術(shù)〖鑒別〗白細(xì)胞、微生物和其他組織
〖保存〗:RT
天青II
〖英文名稱〗:Azure II;,7-Bis(dimethylamino)phenothiazin-5-ium chloride mixt. with 3-(dimethylamino)-7-(methylamino)phenothiazin-5-ium chloride (1:1)
〖其他名稱〗:蔚藍(lán)II;天藍(lán)II;亞甲天青Ⅰ;3,7-雙(二甲基氨基)吩噻嗪-5-〖氯化物〗和3-(二甲基氨基)-7-(甲基氨基)吩噻嗪-5-〖氯化物〗混合物;氮雜脲II
SMD1168 酵母菌種 Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )
BL21-CodonPlus-RIL 菌種 Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )
CCK-8 細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒 Tris 飽和酚
DNA 稀釋液 Tris 緩沖鹽溶液 (TBS)
液體樣品蛋白純化回收試劑盒 TRIzol 伴侶
Rosetta(DE3)plysS 菌種 TSQ(6- 甲氧基 -(8-p- 甲苯磺酰胺 ) 喹啉
Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種 Tth DNA 聚合酶
Rosetta(DE3) 菌種 Tth RecA 蛋白
BL21(AI)菌種 Tth 核酸內(nèi)切酶 IV
JM83 菌種 Tubulin-Tracker Red( 微管紅色熒光探針 )
INVSc1 酵母菌種 Tuner(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞
EHA105 農(nóng)桿菌菌種 Tuner(DE3) 菌種
GS115 酵母菌種 Tuner(DE3)pl