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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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閱讀:184發(fā)布時(shí)間:2018-1-26
即用型評(píng)板培養(yǎng)基原理
ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體 的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每 加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
即用型評(píng)板培養(yǎng)基Rabbit Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA試劑盒 兔血管生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
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Rabbit anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA試劑盒 兔子抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA試劑盒 兔抗平滑肌抗體(ASMA) ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit Apolipoprotein E,Apo-E ELISA試劑盒 兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
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Rabbit apoprotein B100,apo-B100 ELISA試劑盒 兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
rabbit basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA試劑盒 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA試劑盒 兔子B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit Bcl-2 Assaciated X protein,BAX ELISA試劑盒 兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA試劑盒 兔骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
rabbit brain natriuretic peptide,BNP ELISA試劑盒 兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
rabbit Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA試劑盒 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA試劑盒 兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA試劑盒 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rabbit catecholamine,CA ELISA試劑盒 兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒Rabbit catecholamine,CA ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T即用型評(píng)板培養(yǎng)基
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