藥典培養(yǎng)基制備的過程
免疫酶技術(shù)(immunoenzymatic technique)又稱酶免疫測定法,是繼免疫熒光技術(shù)和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的又一種免疫標(biāo)記技術(shù)。它是把抗原抗體的特異性反應(yīng)和酶的催化作用相結(jié)合而建立的。該技術(shù)通過化學(xué)方法將酶與抗體或抗抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)記物，這些酶標(biāo)記物仍保持免疫學(xué)活性和酶的活性，然后將它與相應(yīng)的抗體或抗原起反應(yīng)，形成酶標(biāo)記復(fù)合物，結(jié)合在免疫復(fù)合物上的酶，在遇到相應(yīng)的底物時，則催化底物產(chǎn)生水解、氧化或還原等反應(yīng)，而生成可溶性或不溶性有色物質(zhì)。然后根據(jù)顯色的深淺來反映待測樣品中抗原或抗體的含量，如生成的有色物質(zhì)為可溶性，則可用肉眼比色或酶標(biāo)測定儀測定光密度值(OD)定性或定量；如生成的有色物質(zhì)為不溶性沉淀物，同時又是電子致密物質(zhì)，則可用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡識別和定位。因此，免疫酶技術(shù)是一項定位、定性和定量(敏感度可達每毫升ng~pg水平)的綜合技術(shù)。常用的酶是辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)。
酶結(jié)合物的制備
酶標(biāo)抗體或抗抗體(抗免疫球蛋白)結(jié)合物可采用戊二醛法或過碘酸鹽氧化法制備。郭春祥建立的辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標(biāo)記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備?，F(xiàn)將操作方法介紹如下：
(一) 結(jié)合物的標(biāo)記將5mg HRP溶于05ml蒸餾水中，加入新配制的006mol/L NaIO4水溶液05ml，混勻，置冰箱30min，取出加入016mol/L乙醇水溶液05ml，室溫放置30min后，加入含5mg純化抗體的水溶液(或PBS)1ml，混勻并裝透析袋，以005mol/L、pH值95碳酸鹽緩沖液緩慢攪拌透析6h(或過夜)使之結(jié)合，然后吸出加NaBH4溶液(5mg/ml)02ml，置冰箱2h。將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨，冰箱放置30min，離心，將所得沉淀物溶于少許002mol/L、pH值74 PBS中，并對之透析過夜。次日再離心除去不溶物，即得酶抗體結(jié)合物。用002mol/L、pH值74 PBS加至5ml，進行測定后，冷凍干燥或低溫保存。 酶結(jié)合物的制備
(二) 結(jié)合物中HRP與抗體量的測定酶標(biāo)結(jié)合物于751型分光光度計上分別用280及403nm波長測定其光密度(OD)，并計算出OD403與OD280之比值以及HRP與抗體的mol/L比。
結(jié)合物中HRP濃度(mg/ml)=OD403×04
結(jié)合物中IgG濃度(mg/ml)=(OD280-OD403×03)×062
酶/抗體mol/L比=HRP濃度IgG濃度×4
(三) 結(jié)合物稀釋度的測定
用酶結(jié)合物中抗體相應(yīng)的抗原直接包被聚苯乙烯反應(yīng)板，采用ELISA直接法測定酶結(jié)合物效價。通常本法制備的酶結(jié)合物作1∶10 000稀釋時，其OD403仍在01以上。
藥典培養(yǎng)基Human anti-Histone antibody,AHA ELISA試劑盒 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-IgA antibody ELISA試劑盒 人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-IgE receptor antibody ELISA試劑盒 人抗IgE受體抗體ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-immunodeficiency virus antibody,HIV ELISA試劑盒 人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-insulin receptor antibody,AIRA ELISA試劑盒 人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-IVIgG antibody ELISA試劑盒 人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human Anti-keratin antibody,AKA ELISA試劑盒 人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-Ku-antibody ELISA試劑盒 人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-liver cell membrane antibody,LMA ELISA試劑盒 人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-liver cytosolantibody type 1,LC1 ELISA試劑盒 人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-lymphocyte globulin,ALG ELISA試劑盒 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-lymphocytotoxic antibody,ALA/LCA ELISA試劑盒 人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-macrophage antibody ELISA試劑盒 人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-Mi2-antibody ELISA試劑盒 人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-Monocyte antibody,AMA ELISA試劑盒 人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human antimous antibody,HAMA ELISA 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human antimous antibody,HAMA ELISA 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-mutated citrullinated vimentin antibody,MCV ELISA試劑盒 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA試劑盒 人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA試劑盒 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-myelin antibody IgA,AMA IgA ELISA試劑盒 人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T
Human anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA試劑盒 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格： 96T/48T藥典培養(yǎng)基
