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tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3操作步驟

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更新時間:2017-07-25 14:56:21瀏覽次數:268次

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產品簡介

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3操作步驟售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3操作步驟
形態特性   多角
生長特性  貼壁生長
特征特性   轉染pCAG-tTA質粒,經2.0ug/ml puromycin篩選,為Tet-off穩定調控細胞系,受*Dox調控倍數在20~50倍。細胞倍增時間為24小時。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  5%FBS + 2.0ug/ml puromycin
傳代方法   1:4傳代,2~3天傳代一次。
傳代情況  
凍存條件   基礎培養基+8%DMSO+20%FBS 
支原體檢測  培養法(-)
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  B類

細胞名稱tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3操作步驟
生長特性 貼壁生長
價格來電可享受優惠

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
激活素B(ACVB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
Ⅲ型膠原(COL3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
血小板因子4(PF4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
血小板因子4(PF4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
血小板因子4(PF4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
CD99分子(CD99)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
半乳糖苷酶α(GLα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
半乳糖苷酶α(GLα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
中性粒細胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
*原A(PGA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
*原A(PGA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
*原C(PGC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
*原C(PGC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)    
 CRMP4/DRP3  腦衰蛋白反應調節蛋白4抗體 
 phospho-VAV1(Tyr160)  磷酸化鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 
 phospho-VAV1(Tyr174)   磷酸化鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 
 DYDC1  DYDC1蛋白抗體 
 DHP/Dihydropyrimidinase  二氫嘧啶抗體 
 DPYD  二氫嘧啶脫氫酶抗體 
 DPY19L1  短粗矮胖19蛋白樣1抗體 
 VAV2  癌基因VAV2抗體 
 DPY19L2  DPY19L2蛋白抗體 
 DPY19L4  DPY19L4蛋白抗體 
 DQX1  DQX1蛋白抗體 
 DPP9/DPRP2  二肽基肽酶9抗體 
 DPP8/DPRP1  二肽基肽酶8抗體 
 Matriptase 2  膜型*蛋白酶2抗體 
 CYBR1  細胞色素B還原酶1抗體 
 UQCRC1  輔酶*還原酶核心蛋白1抗體 
 TXNRD1  硫氧環蛋白還原酶1抗體 
 PRDX2/Peroxiredoxin-SO3  硫氧還蛋白過氧化物酶2 
 NDUFA9  NDUFA9蛋白抗體 
 GLT8D2  糖基轉移酶GLT8D2抗體 
 LGI4  含*神經膠質瘤失活蛋白4抗體 
 MTGR1  髓易位基因相關蛋白1抗體 
 LYL1  淋巴細胞性白血病相關序列1抗體 
 Properdin  P因子/備解素抗體 
 RAB6B  RAS癌基因相關蛋白RAB6B抗體 
 ANKRD54  錨蛋白重復域54抗體 
 COX4NB  COX4NB蛋白抗體 
 FAM82A1  微管動力調節蛋白FAM82A抗體 
 FAM46D/CT112  腫瘤/抗原112抗體 
 FAM50B  FAM50B蛋白抗體 
 FAM50C  FAM50C蛋白抗體 
 HDHD1  HDHD1蛋白抗體 
 HDHD2/IER3IP1  HDHD2蛋白抗體 
 HDHD3  HDHD3蛋白抗體 
 


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