【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產(chǎn)品名稱：兔肌腱干細(xì)胞操作步驟
2.組織來源：肌腱組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡介：
兔肌腱干細(xì)胞分離自肌腱組織；肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織，便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上，是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動不同骨的運動。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分，肌腹由肌纖維構(gòu)成，色紅質(zhì)軟，有收縮能力，肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成，色乳白較硬，沒有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長肌的肌腱多呈圓索狀，闊肌的肌腱闊而薄，呈膜狀，又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說的紅肌，而肌腱即為白肌，分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細(xì)胞（TSCs）是一種來源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞，其具有多向分化潛能，并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時該細(xì)胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、軟骨樣細(xì)胞、骨細(xì)胞分化；在裸鼠模型中，肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織，軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言，TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力，軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高，具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。
本公司的兔肌腱干細(xì)胞采用膠原酶、*混合消化法并通過肌腱干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)CD90/CD44、CD34/CD45免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM-F12、FBS、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟(jì)、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM Inhibin Alpha
Cy5標(biāo)記的兔抗羊IgM Inhibin beta A peptide
Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgM Inhibin beta B
Cy7標(biāo)記的兔抗羊IgM Integrin Alpha3
PE標(biāo)記的兔抗羊IgM Integrin Beta5
*標(biāo)記的兔抗羊IgM Integrin alpha 1
辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗羊IgM Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7)
辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG Integrin AlphaE2/CD103
膠體金標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3)
*標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG IQGAP1
Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG IRF-1(Interferon regulatory factor-1)
Cy5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG IRAK 2
Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide
Cy7標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG Integrin a7(integrin alpha 7)
PE標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29)
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG Integrin Alpha5(ITG- AlphaV/CD49e)
PE-CY5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG Integrin alpha V/CD51 peptide
APC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1)
Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG JAK2(Tyrosine-protein kinase JAK2; Janus kinase 2; JAK-2)
Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG phospho JAK2(phospho-Tyr1007+Tyr1008)
堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG JNK1/3 (c-Jun amino-terminal kinase 1/3)
FITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide
Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG Ki-67(Antigen identified by monoclonal antibody Ki
REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit 人再生基因蛋白IV 48T
VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit 人多功能蛋白聚糖 48T
Nfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit 人B細(xì)胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε 48T
ADAMTS4(Human ADAM metallopeptidase with thrombospondin type 1 motif4) ELISA Kit 人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4 48T
Human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 48T
PAQR7(Human progestin and adipoQ receptor family member VII ) ELISA Kit 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ 48T
COLEC11(Human collectin sub-family member 11) ELISA Kit 人集蛋白亞家族成員11 48T
Serpina3g(Human serine/cysteine peptidase inhibitor clade A member 3G) ELISA Kit 人*蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G 48T
Human similar to RIKEN cDNA A630077B13 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA A630077B13 基因 48T
Human similar to RIKEN cDNA 3110050K21 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 3110050K21 基因 48T
Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 48T
human similar to RIKEN cDNA 2010109K09 gene ELISA KIT 人類似RIKEN cDNA 2010109K09 基因 48T
RHOB(Human ras homolog gene family,memmber B) ELISA Kit 人ras同源物基因家族成員b 48T
