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Vero（非洲綠猴腎細(xì)胞）操作步驟

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更新時(shí)間：2017-08-02 11:32:47瀏覽次數(shù)：637次

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Vero（非洲綠猴腎細(xì)胞）操作步驟售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱:Vero（非洲綠猴腎細(xì)胞）操作步驟

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

背景描述

Vero細(xì)胞是由日本千葉大學(xué)的Y·Yasumura和Y·Kawakita從正常成年非洲綠猴的腎臟建株的。1964年6月15日，B·Simizu將Vero細(xì)胞從千葉大學(xué)帶到國立健康研究所(NIH)國立過敏及傳染病研究所熱帶病毒實(shí)驗(yàn)室時(shí)，已傳至第93代。

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

MEM(貨號(hào):PM150410)＋10% FBS(貨號(hào):164210-500)＋1% P/S(貨號(hào):PB180120)

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細(xì)胞名稱	Vero（非洲綠猴腎細(xì)胞）操作步驟
規(guī)格	5×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
價(jià)格	來電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì)：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
胰高血糖素受體抗體 Glucagon Receptor
生長(zhǎng)分化因子3抗體 GDF3
磷酸化糖原合酶激酶3β抗體 phospho-GSK-3 Beta(Ser21)
G蛋白偶聯(lián)受體1抗體 GPR1
G蛋白β1抗體/*核苷酸結(jié)合蛋白β亞基1 G protein beta 1
G蛋白β3抗體/*核苷酸結(jié)合蛋白β亞基3 G protein beta 3
鳥苷酸還原酶2抗體 GMPR2
G蛋白偶聯(lián)受體γ12抗體 G gamma12
生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白2抗體 GRAP2
G蛋白α亞單位蛋白Q抗體 GNAQ
生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因GADD45β抗體 GADD45B
細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白22抗體（甲基化控制J蛋白） GIG22
G蛋白偶聯(lián)受體39抗體 GPR39
橋尾蛋白抗體 Gephyrin
半乳糖凝集素8抗體 Galectin 8
糖磷脂酰肌醇錨定蛋白137抗體 GPIP137
胰高血糖素樣肽2受體抗體 GLP2R
生長(zhǎng)休止特定蛋白1抗體 Gas1
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈1抗體 GGTL1
γ1氨基丁酸受體α5/GABRα5抗體 GABRA5
G蛋白激活內(nèi)向鉀通道1抗體 GIRK1
G蛋白激活內(nèi)向鉀通道3抗體 GIRK3
G蛋白偶聯(lián)受體48抗體 GPR48
糖基轉(zhuǎn)移酶GLT8D2抗體 GLT8D2
高爾基體外周膜蛋白p65抗體 GRASP65
細(xì)胞核因子GCNF/維甲酸受體相關(guān)受體抗體 GCNF
G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體 GNAT2
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 1
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 2
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 3
轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體 Gli2
轉(zhuǎn)錄因子Gli3抗體 Gli3
GLIS2蛋白抗體 GLIS2
鳥苷酸環(huán)化酶激活蛋白1抗體 Guanylin
Ai-Phospho-Smad2 (Ser465/467)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG 植物葉綠體總蛋白定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2抗體IgG 植物葉綠體外膜功能檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-Smad3 (Ser423/425) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體IgG 植物葉綠體外膜脂質(zhì)薄層色譜（TLC）分析檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-Smad4/FITC 熒光素標(biāo)記Smad4抗體IgG 純化葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-Smad7/FITC 熒光素標(biāo)記Smad 7抗體IgG 植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-SMC1/FITC 熒光素標(biāo)記染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高純分離試劑盒 0.2ml
Ai-Phospho-SMC1 (Ser957)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)１抗體IgG 植物細(xì)胞葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-SMN1/FITC 熒光素標(biāo)記運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1抗體IgG 大量植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒 0.2ml
Ai-Snail/FITC 熒光素標(biāo)記抗Snail蛋白抗體IgG 植物乙醇酸氧化酶（glycolate oxidase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體（蝮蛇）IgG 植物核酮糖1,5二磷酸羧化/加氧酶（RUBPCase/Rubisco）羧化活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-Snake poison Protein/FITC 熒光素標(biāo)記抗蛇毒蛋白抗體（中華眼鏡蛇）IgG 植物核酮糖1,5二磷酸羧化/加氧酶（RUBPCase/Rubisco）加氧活性定量檢測(cè)試劑盒 0.2ml
Ai-SNAP-25 /FITC 熒光素標(biāo)記突觸相關(guān)蛋白25抗體IgG 植物核酮糖1,5二磷酸羧化/加氧酶活化酶