翻譯后修飾（PTMs）是對(duì)蛋白質(zhì)的動(dòng)態(tài)、嚴(yán)格調(diào)節(jié)的改變，它通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、空間定位和互作、從而控制其功能，PTMs主要包括磷酸化、甲基化、乙酰化（Ac）、泛素化（Ub）、SUMO1或2/3等方式，但還有許多其它的，PTMs的錯(cuò)誤調(diào)節(jié)與癌癥、心力衰竭、神經(jīng)和代謝性疾病等的進(jìn)展有關(guān)。

蛋白質(zhì)發(fā)生PTM后，會(huì)顯著改變蛋白的理化及構(gòu)象，從而直接改變蛋白的結(jié)合能力與功能。因此,即使蛋白的表達(dá)水平?jīng)]有改變，但如果翻譯后修飾的狀態(tài)發(fā)生改變，蛋白的功能也會(huì)顯著變化。zui終，PTM實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)功能的指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。

PTM對(duì)蛋白功能影響是多樣性的，表現(xiàn)在以下三個(gè)方面：（1）同一蛋白質(zhì)，即使只發(fā)生一種類型的修飾，也會(huì)賦予其多種功能；（2）同一個(gè)蛋白的同一種翻譯后修飾，如果發(fā)生在不同的氨基酸上，其功能也不同；（3）同一蛋白還可能具有不同的修飾，其功能和參與的生物過程就更為復(fù)雜。下圖以intermediate filament protein（IF蛋白）為例：

NatureReviews Molecular Cell Biology 15, 163–177 (2014)

蛋白修飾及功能的多樣性是維持機(jī)體復(fù)雜精準(zhǔn)調(diào)控的基礎(chǔ)，但同時(shí)也給研究PTM的科研人員的研究造成了很多的困擾，為什么蛋白質(zhì)翻譯后修飾的鑒定難度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于未發(fā)生修飾的蛋白質(zhì)的鑒定了，主要有以下幾點(diǎn)：

1.發(fā)生翻譯后修飾的蛋白質(zhì)樣本量相對(duì)較少

2.發(fā)生修飾時(shí)形成的共價(jià)鍵非常不穩(wěn)定，且處于動(dòng)態(tài)變化中

3.修飾與未修飾的蛋白及多種修飾形式的蛋白常混合存在

Signal-Seeker™ kit用于分析各種蛋白翻譯后修飾的情況：如賴氨酸乙酰化、泛素化、SUMO化、磷酸化等修飾的鑒定及各種修飾的上調(diào)下調(diào)表達(dá)。使用親和磁珠從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中提取并富集修飾蛋白。然后通過標(biāo)準(zhǔn)的Western blot程序分析濃縮蛋白群，zui終用戶使用自身的抗體檢測(cè)所需的修飾蛋白。

Signal-Seeker™ kit應(yīng)用實(shí)例：

Signal-Seeker™試劑盒研究Rac1蛋白的單泛素化和多元泛素化

文章來源：艾美捷科技