血漿/血清游離RNA或外泌體RNA是某些癌癥和疾病的潛在生物標志物。如何從收集與保存的血漿和血清樣本中分離出RNA(cf-RNA)呢?艾美捷慢慢道來...
血漿游離RNA提取試劑盒
從不同體積的血漿中純化cf-RNA。該血漿由EDTA收集的血液中制備而來。然后將3ul純化的RNA用作RT-qPCR反應中的模板,以檢測miR-21(圖A)和5S rRNA轉錄物(圖B)。miR-21和5S rRNA轉錄物的相對含量隨著樣上樣量的增加而線性增加。
將純化的cf-RNA洗脫至不同的體積。然后將3ul純化的RNA用作RT-qPCR反應中的模板,以檢測miR-21。隨著洗脫體積的增加,miR-21的相對量增加,表明在非常低的洗脫體積中血漿cf-RNA仍然有比較好的有效濃度。
血漿/血清RNA提取試劑盒各品牌橫向對比
血漿中miRNA有效性和一致性檢測。Norgen試劑盒與Q、A、E試劑盒從血漿中分離miRNA。使用miR-21特異的引物進行莖環(huán)RT-qPCR。與其他分離方法相比,只有Norgen試劑盒能夠顯示miR-21轉錄本高一致性和回收率的產品。使用Norgen試劑盒從200μL血漿中回收miRNA高于使用競爭對手A試劑盒從600μL純化的RNA中回收的miRNA。
艾美捷血漿游離RNA提取試劑盒的特色與優(yōu)勢:
1.分離所有大小的游離和外泌體RNA,包括microRNA;
2.多種血漿和血清輸入量(50?L-5mL);
3.沒有苯酚提取物;
4.沒有載體RNA;
5.結合并洗脫所有RNA,無論大小或GC含量如何,無偏差
6.將游離的RNA和外泌體RNA濃縮至靈活的洗脫體積;
7.短時間內純化高質量的RNA。
8.純化的血漿/血清RNA可用于很多下游應用,包括PCR,qPCR,甲基化敏感的逆轉錄qPCR,逆轉錄PCR,RNA印跡,RNA酶保護和引物延伸,表達陣列測定和NGS。
文獻參考:
1.MicroRNA molecular profiling from matched tumor and bio-fluids in bladder cancer.Molecular Cancer. 2015.
2.Serum microRNA-34a is potential biomarker for inflammation in nonalcoholic fatty liver disease.Asian Biomedicine. 2016.
3.Circulating MicroRNAs: Association with Lung Function in Asthma.PLOS ONE. 2016.
4.Circulating nucleic acids damage DNA of healthy cells by integrating into their genomes.Journal of Biosciences. 2015.
Norgen Biotek成立于1998年,公司總部位于加拿大,是一家著名全球化生物技術公司,生產基于zhuanli技術的核酸和蛋白質純化及富集產品用于研究和診斷。目前該公司的產品多達700余種,提供1流的樣品制備試劑盒,應用于基因組和蛋白組等不同的領域。艾美捷科技是Norgen的中國總代理商,為您提供優(yōu)質的產品+服務。