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人P 選擇素(PS)酶聯免疫分析試劑盒

閱讀:106發布時間:2019-03-26

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人P 選擇素(PS)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟:

1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標

準品 100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二

孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,

混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各

取 50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl,混

勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準

品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,

濃度分別為24ng/L,16ng/L ,8ng/L,4ng/L,  2ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣

品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣

品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混

勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同 3。

8. 洗滌:操作同 5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 人P 選擇素(PS)酶聯免疫分析試劑盒測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后 15分鐘以內進行。


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