一、從土壤中分離放線菌

1.制作高氏一號培養基，趁熱注入培養皿中，凝成平板，待用。

2.稱取土壤10克，放入裝有100毫升無菌水的錐形瓶中，并加入10%酚10滴，以抑制細菌生長。振蕩10分鐘，制成10-1菌懸液。按照連續稀釋分離法，進一步制成10-3菌懸液。

3.用移液管吸取0.1毫升10-3菌懸液，注入平板培養基上，用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻涂抹在整個培養基上。然后將培養皿倒置于25-30℃溫箱中，培養7-10天，培養基上會出現微生物菌落。如果菌落的硬度較大，干燥致密，且與基質緊密結合，不易被針挑起，這就是放線菌菌落。

4.挑取放線菌菌落，接種于斜面培養基上。

二、從土壤中分離霉菌

1.制作豆芽汗葡萄糖培養基，并添加80%乳酸數滴，以抑制細菌生長。將培養皿中，凝成平板，待用。

2.稱取10克土壤，按上述分離放線菌的方法制成10-4或10-5的菌懸液。

3.取0.1毫升菌懸液注入培養皿內培養基上，用玻璃刮刀涂抹均勻。然后將培養皿倒置于25-30℃溫箱內培養3-4天。培養基上會出現微生物菌落。霉菌菌落常長成絨狀、棉絮狀或蜘蛛網狀，可根據這一特征尋找霉菌菌落。

4.挑取培養皿內的霉菌菌落接種于斜面培養基上

三、從飲水中分離大腸桿菌

1.制作伊紅美藍培養基，趁熱注入培養皿中，凝成平板，待用。

2.用滅過菌的錐形瓶盛取河水或溝水，按1:10稀釋。

3.取0.1毫升稀釋液接種于伊紅美藍培養基上。用平板劃線分離法進行分離。

4.將劃線后的培養皿倒置37℃溫箱中培養18-24小時。培養基中會出現大腸桿菌菌落，菌落中心呈暗藍黑色，發金屬光澤。

5.將菌落接種于斜面培養基上（由營養瓊脂培養基制成）。