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標(biāo)簽:Hanks緩沖液 古朵生物 PBS緩沖液 生化試劑
PBS緩沖液和Hanks緩沖液的區(qū)別
實(shí)驗(yàn)時(shí)經(jīng)常用到PBS緩沖液,但是很多文獻(xiàn)里面也用到了Hanks緩沖液,不知道這兩種緩沖液在細(xì)胞培養(yǎng) 方面有什么區(qū)別嗎?也就是說它分別適合于哪些情況?
PBS :磷酸緩沖鹽溶液——具有pH緩沖作用的等滲鹽溶液。PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇K2HPO4和KH2PO4配制,因?yàn)殁c鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液,稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽,也可以用pH計(jì)調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。
其配置方法如下:采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步驟進(jìn)行:
(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;
(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 將18.2%(體積分?jǐn)?shù))KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;終 測定PBS液的PH值約為7.4。其作用接近于生理鹽水,但是在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)比生理鹽水的用途要廣泛。
Hanks:平衡yan溶液——無機(jī)鹽和葡萄糖濃度接近大部分動(dòng)植物 細(xì)胞的水平,可作為動(dòng)植物細(xì)胞短期培養(yǎng)(保存)。 Hank's配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14; NaHCO3 0.35;KH2PO 4 0.06;Glucose 0.34(g/l); D-Hank' s:不含鈣離子、鎂離子、葡萄糖。( T7 e# L7 e, K2 N
相比較而言,hanks液中鹽成分較PBS 復(fù)雜,且有葡萄糖,可為細(xì)胞提供簡單的營養(yǎng),而pbs中只有磷酸根,鈉,鉀,氯離子,只是簡單的鹽平衡緩沖液,不能為細(xì)胞提供暫時(shí)的營養(yǎng) 。
關(guān)鍵要看你用這些液體來洗細(xì)胞還是存儲(chǔ)細(xì)胞了
PBS 、hanks各都有兩種,一種是含鈣鎂的,另一種是不含鈣鎂的:DPBS,DHANKS。 r) u7 n6 e3 R% P
hanks比PBS成分稍微復(fù)雜點(diǎn),一般細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)用DPBS就夠,Dhanks一般用到原代細(xì)胞消化分離操作實(shí)驗(yàn)中,一般培養(yǎng)用PBS就夠了,感覺DHANKS上場的實(shí)驗(yàn)比較高級(jí)點(diǎn)哎,對(duì)于保護(hù)細(xì)胞活力等很有好處。
HANKS對(duì)細(xì)胞略好, 不過一般洗滌等用PBS足夠了。 分離時(shí),兩者皆可, 多數(shù)推薦HANKS,實(shí)際上差不多。如果分離時(shí)消化時(shí)間較長, 建議HANK BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護(hù)"或“載體"作用,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響。對(duì)多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切*,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過1h時(shí),BSA可以使酶加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至短的時(shí)間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
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