ELISA夾心法實驗步驟和注意事項

　　今天古朵技術小編和大家分享的是ELISA夾心法實驗步驟以及注意事項。

　　1.包被

　　pH9.5 碳酸鹽緩液稀釋4D7單克隆抗體粗提γ球蛋白至1 μg/ml，加入96孔板，100 μl/孔，放4 ℃，36 小時。

　　2.封閉

　　0.1 %吐溫PBS(Buffer A)沖洗96孔板三次，加3 %BSA Buffer A(Buffer B)200 μl/孔，放37 ℃，1 小時。

　　3.加待檢樣品

　　Buffer A 沖洗96孔板三次，加待檢樣品及Buffer B 稀釋的標準品100 μl/孔，放37 ℃，3 小時。

　　4.加酶標抗體

　　Buffer A沖洗96孔板五次，3 %PEG Buffer A稀釋酶標抗體至1∶800，加入96孔板，100 μl/孔，放37 ℃，1 小時。

　　5.顯色

　　Buffer A沖洗96孔板五次，pH5.4檸檬酸緩沖液溶解底物(ABTS))，0.2 mg/ml，加3 %H2O2，2 μl/ml，加入96孔板，100 μ/孔，室溫下或37 ℃顯色。

　　注意事項

　　1.待檢標本如為血清，應采用一次性容器，血液采集后盡快(6小時以內)分離血清。

　　2.封閉液或抗體稀釋液應新鮮配制或凍存。

　　ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。