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血清總補體溶血活性(CH50)測定
試管法(改良Mayer法)
1.致敏羊紅細胞:2%綿羊紅細胞等量2U溶血素,混勻,置37℃水浴30min。
2.稀釋血清:待檢血清0.2ml,加緩沖液3.8ml,稀釋度為1:20。
3.配制溶血標準管:2%綿羊紅細胞2ml加蒸餾水8ml,混勻,即為全溶血管。取全溶血管液2ml加緩沖液2ml,即為50%溶血管。
4.按下表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置37℃水浴30min,第10管為非溶血對照。
5.結果測定:取出試管,2 000r/min離心10min,對照管應不溶血。肉眼比色,選與50%溶血標準管相近兩管,再用分光光度計測(波長542nm 0.5cm比色杯)OD值,確定與標準管zui接近者為終點管,然后按下公式計算CH50值:血清補體CH50(U/ml)=(1/血清用量)×稀釋度。
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