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大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒的臨床意義

2014-7-28  閱讀(1788)

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提  供  商 南京信帆生物技術有限公司 資料大小 142.6KB
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上海信帆生物代理銷售“大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒”,歡迎!

 

血清β2—微球蛋白的升高可反映腎小球濾過功能受損或濾過負荷是否增加的情況;
而尿液中排出β2—微球蛋白增高,則提示腎小管損害或濾過負荷增加;
在急慢性腎盂腎炎時,因腎臟受損,故尿β2—微球蛋白升高,
而膀胱炎患者則β2—微球蛋白正常;
腎移植患者血、尿β2—微球蛋白明顯增高,提示機體發生排斥反應,因β2—微球蛋白合成加速,雖腎清除增多,而血β2—微球蛋白仍增高。一般在移植后2~3天血β2—微球蛋白上升至高峰,隨后逐漸下降。腎移植后連續測定血、尿β2—微球蛋白可作為腎小球和腎小管病變的敏感指標。如腎移植雖有少尿,但血β2—微球蛋白下降者提示預后良好。排異時血β2—微球蛋白增高先于Cr,測定β2—微球蛋白,有助于診斷尚處于亞臨床期腎發生的排斥反應。

大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒
尿β2微球蛋白測定也有助于鑒別上、下尿路感染,上尿路感染易影響腎小管對分子蛋白質的再吸收,尿β2微球蛋白升高,而下尿路感染尿β2微球蛋白不會升高。
β2—微球蛋白,英文縮寫為β2—MG,檢測被認為是衡量糖尿病患者輕度腎功能減退和療效觀察的一項簡便、而又敏感的方法。故而β2—微球蛋白的測定在臨床上是有多種價值的。
1.測定主要用于監測近端腎小管的功能。在急性腎小管損傷或壞死、慢性間質性腎炎、慢性腎衰等情況下,均可使得尿β2—MG顯著升高。腎移植患者血、尿β2—MG明顯增高,提示機體發生排異反應;腎移植后連續測定β2—MG可作為評價腎小球和腎小管功能的敏感指標。糖尿病腎病早期有腎小管功能改變,尿β2—G也會升高。

大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒
2.在系統性紅斑狼瘡活動期,造血系統惡性腫瘤,如慢性淋巴細胞性白血病時,尿液β2—MG也有升高。可以和血液β2—微球蛋白共同測定,共同用于上述疾病的診斷。參考值為0~0.2mg/L


本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍: 96T
2ng/L -80 ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中β2-微球蛋白(β2-MG)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)水平。用純化的
大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次
加入β2-微球蛋白(β2-MG),再與HRP 標記的β2-微球蛋白(β2-MG)抗體結合,形成抗
體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉
化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β2-微球蛋白
(β2-MG)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算
樣品中大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)濃度。
試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品(160 ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
80 ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
40 ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
20 ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
10 ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
5 ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。
大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒操作程序總結:
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,
即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月

大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)ELISA試劑盒

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