疑問一:小鼠ELISA試劑盒說明書上說洗板時要把孔里的水甩干,可我做的時分,不管我怎樣拍,孔底仍是有殘留液體,請問這對試驗有沒有影響?或著有沒有別的啥好的方法可以處理這個疑問?
答:有一定的影響.特別二抗反響后洗刷欠好,會呈現(xiàn)非特異.實驗中洗刷是關鍵.盡可能甩干,并且盡量少拍,紛歧定每次都很干,可是zui終一次洗刷要盡量干.洗刷中另一個值得注意的是盡量不要出氣泡. 假如有條件的話,可用洗板機。
疑問二:1%bsa,你是用啥稀釋的,我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,成果關閉的作用都不怎樣顯著,與不關閉差不多.
答:1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有即是要注意你的操作,布景高紛歧定是關閉的疑問。
疑問三:啥才叫關閉好了呢?有沒有啥規(guī)范?
答:通常用1%BSA,150μl,37度,2h,假如還有非特異反響的話,可能有別的因素,比方加樣時濺到了壁上或有氣泡,洗刷不充分,二抗?jié)舛冗^高,關閉物不合適以及反響條件是否妥當?shù)取T谖夜炯寄軉T的輔導下,老師相繼完成了他的試驗,小鼠ELISA試劑盒并且試驗作用也取得了預期的抱負。
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