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細胞名稱 人肝癌細胞;BEL-7404
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 用Northern blot方法,未能檢測到細胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12;FGA:21TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內進行。
凍存培養基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
20支 鳥氨酸脫羧酶肉湯發酵管 鳥氨酸脫羧酶肉湯發酵管 BR
Anti-E.coli O6 大腸桿菌埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6) 20支 3% NaC1鳥氨酸脫羧酶發酵管 3% NaC1鳥氨酸脫羧酶發酵管 BR
Anti-E.coli DH-5 Alpha DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體 20支 3.5% NaC1鳥氨酸脫羧酶發酵管 3.5% NaC1鳥氨酸脫羧酶發酵管 BR
Anti-E.coli O157:H7 大腸桿菌埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7) 20支 精氨酸脫羧酶對照發酵管 精氨酸脫羧酶對照發酵管 BR
Anti-EPEC/E.coli 腸致病性大腸桿菌抗體 20支 3% NaC1精氨酸脫羧酶發酵管 3% NaC1精氨酸脫羧酶發酵管 BR
Anti-E.coli/EPEC 抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體 20支 3.5% NaC1精氨酸脫羧酶發酵管 3.5% NaC1精氨酸脫羧酶發酵管 BR
Anti-E.coli O139 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139) 20支 賴氨酸脫羧酶肉湯發酵管 賴氨酸脫羧酶肉湯發酵管 BR
Anti-EP3 前列腺素E受體3抗體 20支 3% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管 3% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管 BR
Anti-Ephrin A1 EphA1抗體 20支 3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管 3.5% NaC1賴氨酸脫羧酶發酵管 BR
Anti-EphA4 酪氨酸蛋白激酶A4抗體 20支 色氨酸肉湯發酵管 色氨酸肉湯發酵管 BR
Anti-Ephrin B Ephrin B抗體 20支 MR-VP發酵管 MR-VP發酵管 BR
Anti-phospho-Ephrin B (Tyr331) 磷酸化Ephrin B抗體 20支 尿素酶發酵管 尿素酶發酵管 BR
Anti-phospho-Ephrin B (Tyr317) 磷酸化Ephrin B抗體 20支 明膠發酵管 明膠發酵管 BR
Anti-phospho-Ephrin B (Tyr
TRYPSIN 9004-07-3 1G 蛋白組學級
胰凝乳蛋白酶 CHYMOTRYPSIN 9004-07-3 5G 蛋白組學級
甘氨酸 GLYCINE 56-40-6 1KG 蛋白組學級
甘氨酸 GLYCINE 56-40-6 5KG 蛋白組學級
甲叉雙丙烯酰胺 METHYLENE BIS-ACRYLAMIDE 110-26-9 100G 蛋白組學級
甲叉雙丙烯酰胺 METHYLENE BIS-ACRYLAMIDE 110-26-9 250G 蛋白組學級
甲叉雙丙烯酰胺 METHYLENE BIS-ACRYLAMIDE 110-26-9 50G 蛋白組學級
硫酸胺 AMMONIUM SULFATE 7783-20-2 1KG 蛋白組學級
硫酸胺 AMMONIUM SULFATE 7783-20-2 5KG 蛋白組學級
BRIJ 35 BRIJ 35 9002-92-0 1KG 蛋白組學級
BRIJ 35 BRIJ 35 9002-92-0 5KG 蛋白組學級
十二烷基硫酸鈉 SODIUM DODECYL SULFATE (SDS) 151-21-3 100G 蛋白組學級
十二烷基硫酸鈉 SODIUM DODECYL SULFATE (SDS) 151-21-3 1KG 蛋白組學級
十二烷基硫酸鈉 SODIUM DODECYL SULFATE (SDS) 151-21-3 250G 蛋白組學級
十二烷基硫酸鈉 SODIUM DODECYL SULFATE (SDS) 151-21-3 500G 蛋白組學級
Tris 鹽酸 TRIS HYDROCHLORIDE 1185-53-1 1KG 蛋白組學級
人肝癌細胞;BEL-7404Tris 鹽酸 TRIS HYDROCHLORIDE 1185-53-1 500G 蛋白組學級
二硫蘇糖醇 DTT (DL-DITHIOTHREITOL) 27565-41-9 25G 蛋白組學級
二硫蘇糖醇 DTT (DL-DITHIOTHREITOL) 27565-41-9 5G 蛋白組學級
鹽酸胍 GUANIDINE HYDROCHLORIDE 1950-1-1 100G 蛋白組
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