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細胞名稱 人神經膠質細胞瘤細胞;U251
形態特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:10,11;D16S539:12;D18S51:13;D19S433:13,15;D21S11:29;D2S1338:22,24;D3S1358:16,17;D5S818:11,12;D7S820:10,12;D8S1179:13,15;FGA:21,25;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:16,18
同工酶
染色體
細胞種類
凍存
對培養的細胞進行凍存的方法是將細胞置于含有(DMSO)等冷凍保護劑的*培養基中于液氮中儲存。冷凍保護劑可降低培養基的冰點,并可減緩冷卻速度嗎,大大降低冰晶形成的危險 (冰晶可損傷細胞,導致細胞死亡)。
注:DMSO 可促進有機分子進入組織。操作含DMSO的試劑時,應采用與此類物質安全危害相適應的設備和操作規范,并應按照當地法規處置此類試劑。
細胞凍存指導原則
凍存細胞系以備將來之用時,必須遵守以下原則。與其他細胞培養操作一樣,我們建議您嚴格遵守您所用細胞系附帶的操作說明,以便獲得結果。
1)在高細胞濃度情況下進行培養細胞的凍存,并且細胞傳代次數盡可能少。確保凍存前活細胞百分比至少為90%。請注意凍存條件取決于所用細胞系。
2)細胞應緩慢冷凍,可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器使溫度每分鐘大約降低1°C。
3)必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑
4)將冷凍的細胞于 -70°C 以下溫度儲存;溫度高于 -50°C 時,冷凍的細胞將開始變質。
5)必須使用無菌凍存管儲存冷凍的細胞。裝有冷凍細胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內保存
6)必須穿戴個人防護設備。
7)所有與細胞接觸的溶液和設備均應為無菌狀態。必須采用正確的無菌技術,并且在層流通風櫥內進行。
凍存培養基
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優化,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需*培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
高糖,含L-谷氨酰胺,液體
Anti-Dysferlin Dysferlin蛋白抗體 10升 低糖,粉末
Anti-E2F1 轉錄因子E2F-1抗體 500毫升 低糖,液體
Anti-E2F2 轉錄因子E2F-2抗體 250克 M9 Broth M9肉湯 BR
Anti-E2F3 轉錄因子E2F-3抗體 250克 M9CA Broth M9CA肉湯 BR
Anti-E2F4 轉錄因子E2F-4抗體 250克 M63 Broth M63肉湯 BR
Anti-E2F5 轉錄因子E2F-5抗體 10升 F-12 Nutrient Mixture F-12營養混合物 含L-谷氨酰胺,不含NaHCO3
Anti-E2F6 轉錄因子E2F6抗體 500毫升 不含谷氨酰胺
Anti-E2 tag E2 tag標簽抗體 500毫升 含谷氨酰胺
Anti-HPV16 E7 protein 人瘤病毒16型E7抗體 10升 F-12(DMEM) DMEM/F12培養基 BR
Anti-EAAT1/Glast 膠質細胞谷氨酸運載蛋白1抗體 10升 M199 Medium M199培養基 細胞培養用
Anti-EAAT2 膠質細胞谷氨酸運載蛋白2抗體 10升 RPMI 1640 1640培養基 含L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉
Anti-EAAT3 膠質細胞谷氨酸運載蛋白3抗體 10升 無酚紅,含L-谷氨酰胺
Anti-EBNA 3A EB病毒核抗原-3A抗體 500毫升 無血清,含雙抗
Anti-ECE1 內皮素轉化酶1抗體 500毫升 Hanks’ Balanced Salt solution Hanks’平衡鹽 細胞培養級
Anti-ECE2 內皮素轉化酶2抗體 500毫升×6支
Anti-ECG2 食道癌相關基因抗體 10升 IMDM IMDM培養基 BR
Anti-ECM1 細胞外基質蛋白1抗體 250克 GAUZEˊs Medium 高氏合
500ML 蛋白組學級
麗春紅S (猩紅S) PONCEAU S STAIN 50ML 蛋白組學級
PCR Marker, 含上樣緩沖液 PCR MARKER WITH LOADING DYE 500 µl 生物技術級
PCR Marker, 含上樣緩沖液 PCR MARKER WITH LOADING DYE *DRY ICE* 50RXN 生物技術級
PBS溶液 PBS, 1X, STERILE 20L 超純級
PBS溶液 PBS, 1X, STERILE 500ML 超純級
PBS溶液 PBS, 10X, USP STERILE 500ML 超純級
快黑 K鹽 FAST BLACK K SALT 64071-86-9 100G 高純級
快黑 K鹽 FAST BLACK K SALT 64071-86-9 25G 高純級
TMB PLUS, 液體 TMB PLUS LIQUID 1-COMPONENT SUBSTRA 100ML 生物技術級
TCEP HCl TCEP HCL 51805-45-9 10G 0
TCEP HCl TCEP HCL 51805-45-9 2G 0
APS片劑,100mg APS TABLETS, 150MG 7727-54-0 100 Tablets 生物技術級
人神經膠質細胞瘤細胞;U251陽極緩沖液,10X ANODE BUFFER 1L 超純級
MOPS-SDS 電泳緩沖液 MOPS-SDS BUFFER, 20X 500ML 超純級
MES-SDS 電泳緩沖液 MES-SDS BUFFER, 20X 500ML 超純級
瓊脂糖Ⅰ型,片劑 AGAROSE I TABLETS, 500MG 1000 Tablets 超純級
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