elisa檢測試劑盒校準曲線的控制:被測物轉變為有色溶液的反應稱為顯色反應或發色反應。顯色反應的介質PH條件、顯色劑用量、顯色反應的時間和溫度、為消除共存物干擾而加入的掩蔽劑、甚至加試劑的順序,都要按照方法步驟的要求執行。有時,標準系列雖然不像實際試樣那樣組成復雜,但仍要求與試樣進行同樣的處理步驟,以便控制校準曲線上的數據點的空白、回收率等因素。
建立校準曲線時,測量吸光度的參比有兩種選擇。1.用純溶劑作參比,兩個比色皿都放溶劑時,“樣品比色皿” 的吸光度測定值為比色皿成對性校正值,此后所有樣品吸光度測定值都須扣除此值,進行校正。然后,以純溶劑為參比,測定空白及標準系列的吸光度,繪制校準曲線。2.直接用空白為參比。當兩個比色皿都放空白時,測定比色皿成對性校正值,然后測定標準系列的吸光度,繪制校準曲線。兩種方法得到的兩條校準曲線互相平行,但第一種方法可測定空白的水平,后一種方法不能測定空白,理論上校準曲線通過原點。elisa檢測試劑盒若空白為零,兩條校準曲線重合。無論用什么作參比,實樣測定時應該使用與建立校準曲線相同的比色皿和同樣的參比。 比色皿的成對性校正對于使用已久的比色皿是必要的,尤其是測量吸光度很小的樣品時,校正可保證測量值的可靠性和重復性。
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