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ELISA檢測試劑盒樣本處理:
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品ELISA檢測試劑盒不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit 96T/48T 人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒
Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit 96T/48T 人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒
Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit 96T/48T 人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒
Human Macrophage Colony-Stimulating Factor, M-CSF Elisa Kit 96T/48T 人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒
Human monocyte chemotactic protein 3, MCP-3 Elisa Kit 96T/48T 人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒
Human monocyte chemotactic protein 2, MCP-2 Elisa Kit 96T/48T 人單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒
ELISA檢測試劑盒操作技巧:
1.操作前應(yīng)對試驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。
2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導(dǎo)致效果過錯,試驗重復(fù)性差。
3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說明書舉薦的洗刷次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)停留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
4.要保證加液量一起 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不一致,判別過錯。
5.顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,避免顯色過強。
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